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目的:IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)是世界上最常见的原发性肾小球肾炎,是终末期肾病的常见病因,主要临床表现为蛋白尿、血尿、高血压及肾功能不全。IgAN的病理特征是具有典型的系膜区及毛细血管袢以IgA1为主的免疫复合物沉积,造成IgAN发病机制的根本原因为IgA1分子的异常糖基化,即半乳糖缺乏型IgA1(Gd-IgA1)生成增多,从而使多聚体IgA1的含量升高,免疫复合物沉积在肾小球系膜区,最终造成肾脏损伤。研究表明多种机制影响IgA1的糖基化,而导致半乳糖含量降低的原因关键糖基转移酶:β1,3-半乳糖基转移酶(C1GalT1)、α2,6-唾液酸转移酶(ST6GalNAc-Ⅱ)在其中扮演着主要的角色。通过查阅国内外文献发现,大部分研究者们通过分离外周血或扁桃体中B淋巴细胞进行体外细胞培养,再采用酶联免疫方法(ELISA)或蛋白质印迹法(Western Blot)测定IgA1异常糖基化中关键酶的活性,过程较为繁琐,而本研究选择经肾穿刺活检术确诊的IgAN患者与健康成人者,利用Western Blot检测并比较两组外周血中关键糖基转移酶(C1GalT1、ST6GalNAc-Ⅱ)的表达,从而了解IgAN患者糖基转移酶在其异常糖基化中的作用。 方法:本研究选取2018年6月至2018年12月大连医科大学附属第二临床学院苏北人民医院肾脏内科住院病人中经肾穿刺活检术诊断为IgAN患者31例和门诊健康体检病人20例,取患者肘静脉血约5ml,装入一次性使用人体静脉血采集容器中,利用离心机离心、收集上清液,管体标签均标明患者姓名、住院号、年龄及抽血时间,并放置于-80℃冰箱中冷冻保存,然后应用Western Blot方法检测两组外周血中关键糖基转移酶(C1GalT1、ST6GalNAc-Ⅱ)的表达。收集上述31例IgAN患者和20例门诊健康体检病人的临床资料,包括:性别、发病年龄、血压、尿酸、甘油三酯、血尿、尿蛋白、血清肌酐、肾小球滤过率。所有数据均采用SPSS22.0统计软件进行统计学分析。 结果:1.本研究中共收集了31例IgAN患者和20例门诊健康体检病人的临床资料,包括:性别、发病年龄、血压、尿酸、甘油三酯、血尿、尿蛋白、血清肌酐、肾小球滤过率。其中年龄、性别、血压、尿酸、甘油三酯无统计学差异(P>0.05),IgAN组血尿、血清肌酐水平高于健康成人组,肾小球滤过率低于健康成人组,差异显著(P<0.01)。 2.IgAN组外周血中ClGalT1的表达低于健康成人组、ST6GalNAc-Ⅱ的表达高于健康成人组(P<0.05)。 3.IgAN组C1GalT1表达与血肌酐、蛋白尿呈负相关,C1GalT1蛋白表达越低,血肌酐、尿蛋白值越高,差异有统计学意义(r=-0.411,r=-0.854,P<0.05)。而ST6GalNAc-Ⅱ表达与血肌酐、蛋白尿呈正相关,ST6GalNAc-Ⅱ蛋白表达越多,血肌酐、尿蛋白值越高,差异有统计学意义(r=0.306,r=0.564,P<0.05)。 结论:1.IgAN患者中糖基转移酶C1GalT1的表达下调,ST6GalNAc-Ⅱ的表达上调证实了异常糖基化可能参与IgAN的发病过程。 2.IgAN患者关键糖基转移酶的过度表达与血肌酐、蛋白尿的严重程度相关,提示关键糖基转移酶表达参与了IgAN患者的病情进展。