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宫得健是本课题组依据现代中药研究资料及医学验方成功研制的一种治疗奶牛子宫内膜炎的纯中药制剂。为进一步优化方剂、提高疗效,本研究对原方进行了修改,重组了两个改进方(方剂I、方剂II),并对其急性毒性、致敏性、刺激性、抗炎作用、体外最低抑菌浓度及奶山羊子宫内膜炎模型治疗效果进行了观测。本实验包括以下四方面的内容。1.安全性实验:以方剂I、II最大浓度和最大体积给小鼠灌胃,未测出LD50,说明改进方剂急性毒性作用小,改做最大耐受量(MTD)试验,结果表明MTD>40g/kg;在全身过敏性试验中,改进方对豚鼠的致敏级数为0,无致敏性;眼球刺激性试验中,改进方没有对眼结膜引起充血现象,表明改进方无刺激性,提示出用于子宫灌注不会引起黏膜损伤。2.抗炎与抑菌试验:结果表明,方剂I和方剂II的中剂量组、高剂量组对二甲苯引起的小鼠耳壳水肿均具有显著的抑制作用,方剂I高剂量组对二甲苯引起的小鼠耳壳水肿具有极显著抑制作用。方剂I中剂量组、高剂量组和方剂II高剂量组能够显著抑制肉芽组织增生,与原宫得健方相比,方剂I的抗炎效果较好;体外抑菌试验时,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和链球菌的体外最低抑菌浓度,方剂I分别为0.0125、0.0125、0.1、0.25g生药/ml,方剂II分别为0.025、0.1、0.25、0.25g生药/ml,与原宫得健方比较,方剂I的抑菌效果较好。3.子宫内膜炎模型的建立:利用子宫内膜炎临床病例分离、纯化的大肠杆菌O18作为菌种,建立奶山羊子宫内膜炎疾病模型。然后,将12只奶山羊随机分为2组,每组6只羊。I组羊和II组羊分别自子宫角插管向子宫腔内注入灭菌生理盐水、大肠杆菌(O18)培养液50亿;间隔48h分别注入灭菌生理盐水和细菌一次,细菌每次追加50亿,直至发病。结果,II组羊在第二次接种细菌后6～7d阴门流出少量黄白色脓性分泌物,8～9d分泌物逐渐增多。表明此方法可成功复制奶山羊子宫内膜炎。4.新中药宫得健对奶山羊大肠杆菌性子宫内膜炎的治疗试验:24只子宫腔人工感染大肠杆菌的奶山羊随机分为4组,每组6只,I组羊、II组羊、III组羊、IV组羊分别经子宫角插管注入方剂I 20ml∕次、方剂II 20ml∕次、1%环丙沙星溶液20ml/次,灭菌生理盐水20ml∕次,每3d用药1次。经过3～4次用药,病羊的全身情况和子宫颈口排出物的理化性状均有明显改善,方剂I的效果优于环丙沙星组和方剂II组。