依赖于NAD~+的去乙酰化酶Sir2是一种重要的调控酶类，参与染色质沉默，DNA损伤修复，细胞凋亡，新陈代谢和衰老等细胞生命过程。Sir2蛋白是一类十分保守的蛋白。目前对Sir2蛋白家族的绝大部分研究和成果都集中于真核生物，而对原核生物的Sir2蛋白只有零星报道。本实验研究了异源表达的大肠杆菌(E. coli K12)Sir2同源蛋白CobB以及病原菌结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis H37Rv)的Sir2蛋白。对两种同源蛋白质的表达，纯化，酶活性，最适作用条件，抑制物作用等进行多样化实验。同时进行大肠杆菌cobB基因缺失菌株的参比实验来研究其对抗逆性和耐药性的影响。分别从E. coli K12和Mycobacterium tuberculosis H37Rv基因组DNA中克隆目的基因插入到pET32a表达载体，在大肠杆菌AD494中表达重组蛋白。随后对CobB蛋白进行包括依赖于NAD~+的去乙酰化和ADP—核糖转移活性的测定和性质研究，得到该酶的最适反应温度是25℃，最适反应pH值是9.0±1.0。在偏酸性环境中，抑制物烟酰胺(NAM)，烟酸(NA)，吡嗪酸(POA)和2—羟基—1—萘甲醛(2-Hydroxy-1-naphthaldehyde，HN)对酶活有抑制，而在偏碱性环境中，只有烟酰胺和HN有抑制作用。在体内实验中，发现cobB基因缺失突变株对于热激，酸激的耐受力远远低于野生型菌株，而对吡嗪酰胺，烟酰胺和饥饿的耐受力要高于野生型菌株，并观察到当CobB超量表达时，大肠杆菌的菌体形态发生显著变化。对异源表达的结核分枝杆菌Mycobacterium tuberculosis H37Rv的Sir2蛋白体外实验表明，其最适温度和最适pH值与重组的CobB蛋白相同，但ADP—核糖转移活性的比大肠杆菌CobB强，抑制物的抑制作用类似。研究结果为进一步了解Sir2蛋白在细菌中的作用提供了一定的基础，并为研究抗结核药物PZA的抑菌机制提供了新的线索。