目前，肿瘤已成为引起人类死亡的主要病因，基因疗法有可能成为继手术、放疗和化疗等之后应用于肿瘤治疗的新手段。肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体即TRAIL可诱导多种肿瘤细胞凋亡，而对正常组织细胞无凋亡诱导作用且无毒副作用，它将对肿瘤的靶向性和治疗性集于一体，有可能成为肿瘤的基因治疗中较为理想的治疗基因和新一代广谱抗癌药物。 为了探讨TRAIL引起细胞凋亡的机制以及将其用于基因治疗和作为抗肿瘤药物进行开发的前景。我们进行了关于人TRAIL基因cDNA的克隆及真核和原核表达载体构建的课题研究，结果如下：1.通过RT-PCR方法从人胎盘组织中扩增出长度为1039bp的人TRAIL基因的cDNA序列，PCR产物经凝胶回收纯化后，克隆在pGEM-TEasy载体的T位点，命名为T-TRAIL。测序结果和序列分析显示，本研究成功地克隆了TRAIL基因的全长cDNA。2.用NotⅠ分别酶切消化T-TRAIL和质粒pIRESneo3，消化后的质粒pIRESneo3直接进行5’端去磷酸化反应，后与用琼脂糖凝胶回收的TRAIL片段经T4DNA连接酶连接在一起。用PCR方法和酶切方法检测，结果表明成功构建了具有核糖体进入位点和CMV强启动子的人TRAIL基因的真核表达载体。3.以克隆好的TRAIL全长cDNA为模板，以带有BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物扩增了560bp的TRAIL可溶性胞外区片断，并将其和质粒PET-28a相连，结果成功构建了人sTRAIL基因的原核表达载体。4.将重组质粒转化大肠杆菌BL21菌株，经IPTG诱导，SDS-PAGE检测，TRAIL蛋白得到了高效表达。超声破碎表达菌，离心后收集沉淀及上清液，SDS-PAGE鉴定，结果表明表达蛋白大部分以包涵体形式存在。