【摘 要】
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PEX存在于大多数MMPs羧基末端,是多种物质的结合位点,它的突变对MMPs功能有着重要的影响。并且它可通过MMPs的自身作用被降解,产生一分子质量为29kDa—32kDa的PEX片段。在各
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PEX存在于大多数MMPs羧基末端,是多种物质的结合位点,它的突变对MMPs功能有着重要的影响。并且它可通过MMPs的自身作用被降解,产生一分子质量为29kDa—32kDa的PEX片段。在各种人类胶质瘤、内皮、乳房和前列腺的癌细胞系的培养基中都可以检测到PEX片段。PEX片段是MMPs的内源性活化抑制剂,在不同病理生理条件下可以抑制血管生成。在肿瘤的转移和胚胎植入的过程中,MMPs起到了很大的作用尤其是MMP2和MMP9,它们通过降解ECM来促进肿瘤和滋养层细胞的侵袭。作为MMPs的内源性活化抑制剂,PEX在这些过程中可能也会起着重要的作用,但其在胚胎植入中的功能却知之甚少。目的:本实验通过构建pET32a/PEX原核表达质粒,表达并提纯重组蛋白,为进一步研究PEX基因的功能和蛋白的作用奠定基础。并采用Transwll实验,分析重组蛋白pET32a/PEX对结肠癌细胞侵袭的影响及其对侵袭影响的剂量关系,探讨其作用机理,为将来探寻PEX在胚胎发育、胚胎植入和肿瘤侵袭中的作用奠定良好的实验基础。方法:1.RT-PCR法扩增MMP9-PEX基因,经限制性内切酶酶切后克隆入原核表达载体pET32a中,构建原核表达质粒并进行酶切和
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