hUC-MSCs移植对早产儿脑白质损伤模型脑内GDNF含量影响和行为评估的研究

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目的:探讨移植人脐带间充质干细胞(human umbilical cordmesenchymal stem cells,hUC-MSCs)对早产儿脑白质损伤(WhiteMatter Damage,WMD)模型脑内胶质细胞源性神经营养因子(glialcellline-derived neurotrophic factor,GDNF)含量的影响,以及鼠远期神经行为学改变的影响。  方法:取3日龄清洁级Sprague-Dawley大鼠,随机分为实验组、对照组和假手术组,实验组和对照组均结扎左侧颈总动脉并吸入6%的氮氧混合气体4h,假手术组仅游离血管,不予结扎及缺氧处理;实验组术后24h内腹腔内注射0.5ml hUC-MSCs(细胞浓度为2×106/ml),连续注射三天。对照组及假手术组注射相同剂量生理盐水。HE染色观察大体病理变化,采用免疫组织化学方法检测各组模型5、7和14日龄时脑内GDNF蛋白表达情况。P28测试模型鼠的体格发育并进行神经行为学评估(悬吊实验、旷场实验、拒俘实验)。  结果:HE染色显示:7日龄时实验组大鼠脑组织未见明显细胞水肿、变性和坏死;对照组大鼠可见部分神经细胞变性、坏死;假手术组大鼠脑组织细胞轮廓正常、排列整齐。5、7、14日龄时,假手术组正常脑内均含有少量的GDNF,而对照组大鼠脑内GDNF蛋白表达量在各时间点均较假手术组增高(P<0.01),且呈逐渐下降趋势。实验组大鼠脑内GDNF蛋白表达量最高,5日龄时GDNF蛋白含量即增高明显,且呈逐渐升高趋势,14日龄时增高最明显。实验组3个时间点蛋白表达水平较对照组和假手术组均明显增高(P<0.01)。行为学评估观察到实验组大鼠较对照组大鼠远期行为学改善明显。  结论:缺氧缺血增加了脑组织内GDNF的表达,hUC-MSCs可促进早产儿脑白质损伤模型脑内GDNF表达量,能够改善脑白质损伤模型鼠的远期神经行为学的能力,促进神经功能恢复及未成熟脑的发育。
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