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目的：观察SB对细胞活性的影响，研究SB体外抗CVB3m的作用效果与机制；探讨SB在大鼠体内药代动力学参数；阐明SB体内抗CVB3m的作用机制和对CVB3m感染所致的心肌免疫损伤（细胞凋亡及CMC）的靶效应。 方法：①采用微量细胞培养技术和生物染料摄入法，以CPE及细胞活性为判定指标，观察不同浓度的SB抗CVB3m作用及对细胞活性的影响。确定SB对细胞的TD0、TD50和抑病毒率和抑病毒指数。②以40mg/kg的剂量给大鼠灌胃后，于不同时间收集尿液并取心、肝、肾，采用高效液相色谱法测定样品中SB的含量。③应用克隆测序法鉴定CVB3m诱导BALB/c小鼠心肌炎模型。④通过建立CVB3m腹腔注射诱导的BALB/c小鼠心肌炎模型，观察SB对CVB3m感染小鼠发病后的整体状态变化，包括体重变化、进食水情况，比较各组小鼠VMC的发病率和死亡率，并观察了SB对小鼠心脏体重比、心肌病理组织学及超微结构变化的影响，全面整体的评价了SB对VMC小鼠的整体保护作用。⑤采用免疫组化检测造模小鼠灌服SB后不同时间心肌细胞中iNOS、Fas的表达，并应用TUNEL法检测心肌细胞凋亡，探讨SB对感染心肌细胞凋亡的影响。⑥应用RT-PCR技术检测感染小鼠给药后不同时间心肌组织中CVB3mRNA的复制和iNOS、Bcl-2、Fas的mRNA表达，博士学位论文黄琴贰抗CvB、和调控cV队感染小鼠心肌免疫损伤及细胞凋亡的实验研究探讨SB在CVB、感染过程中调节心肌组织中细胞凋亡的机制。结果一体外实验实验发现低于T氏的SB对细胞活性未见明显影响，并在一定浓度范围内有促细胞生长的作用。药物组对CVB加增殖均有抑制作用，尤以SB组作用最明显，优于X口、黄琴及Ri bavirin组，抑制率为109.既;各组抑病毒指数均高于2，有明显的抑病毒作用，与R ibavirin组比较，SB及X口的抑病毒指数有显著差异。二、药代动力学实验经检测尿液SB含量及计算，SB在大鼠体内的代谢符合二室动物模型。并发现SB在心、肝中含量较高。三、动物实验（一）克隆测序鉴定模型。模型组7天小鼠的心肌内CVB如扩增产物克隆测序结果与CVB、Naney株全序列判读828bp，错配5个碱基，符合率为99.5%。（二）感染小鼠多在3一4天后出现病态表现，症状严重者可导致死亡，死亡多发生在5一10天。模型组93%发病，总死亡率70%;SB组的发病率和死亡率均低于模型组及病毒灵组，并有显著性差异。病毒感染后，感染小鼠心脏重量增加，体重下降，心脏重量系数增高，模型组尤为明显，与正常组比较有显著性差异（P<0 .05）;SB与模型组比较，各项均有显著差异（P<0 .05）。SB对心肌博士学位论文黄琴贰抗CVB、和调控CvB、感染小鼠心肌免疫损伤及细胞凋亡的实验研究病理组织学及电镜超微结构均有明显改善作用，SB组作用优于病毒灵组(P（0 .05）。（三）分别采用免疫组化法及TUNEL法检测造模小鼠给药后不同时间心肌细胞1 NOS、FaS的表达及心肌细胞凋亡情况。结果SB在恻C急性期能明显增加心肌细胞iNOS及FaS的表达，诱导心肌凋亡细胞，与模型组相比有显著差异（P<O.05）。而在恢复期能明显减少心肌细胞iN伍及Fas的表达，减少心肌凋亡细胞，与病毒灵组相比有显著差异（P<0 .05）。 （四）达。结果:应用RT一咫R方法，检测心肌细胞内C跟，的刚A表达和iNOSInl俐A表正常组CVB潇酮A与1 NOS而酮A的表达均为阴性。模型组小鼠的心肌内C姐加刚A与iN咙而州A的表达均明显高于正常组，CVB、的表达第5天达到高峰，后逐渐下降，CVB枷的表达增强与iN咙而酮A的表达增强同时存在。SB组3一5天iNOS 11识NA的表达均明显高于模型组（P<0 .05），5天后逐渐阳氏;与病毒灵组比较有显著差异(P（0.05）。（五）应用RT一PCR方法，检测心肌细胞内Bd一2和Fas的而州A表达。结果:1、正常对照组在实验过程中见少量Fasmf州A的表达，其余各组可见大量表达，在造模第3一7天表达量均呈上升趋势，随后各组的含量均呈下降趋势，SB组的含量显著高于模型组和病毒灵组（P<0 .05）。2、正常组的心肌可见到一定量的Bd一Zml酮A表达，造模第3一7天，模型组的Bcl一2的耐训A量逐渐增加，高于正常组，SB组的含量则明显低于模型组。7天后模型组Bd一2的表达逐渐博士学位论文黄答贰抗CVB、和调控Cv氏感染小鼠心肌免疫损伤及细胞凋亡的实验研究降低，而SB组Bcl一2的表达逐渐升高，渐恢复正常。结论一、体外实验通过比较SB作用于细胞与病毒的不同环节，提示SB具有保护细胞减轻病毒感染功效及直接杀伤CVB、的作用。二、药代动力学实验灌胃给药后，SB在大鼠体内的代谢符合二室动物模型。并发现SB在心、肝中含量较高。三、动物实验（一）采用克隆测序法鉴定造模毒株，方法先进，指标灵敏、可靠，适于推广应用;证实本实验所选用毒株为柯萨奇病毒氏亲心肌株;本实验模型符合急性诩C模型。（二）通过比较观察心脏体重比、病理组织学及电镜超微结构变化，发现SB对CVB:、VMC小鼠有明显的整体保护作用，使小鼠死亡率明显阳氏，VMC发病率降低，生存质量明显提高;并对心肌细胞损伤均有明显保护作用，优于病毒?