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目的:检测免疫性血小板减少症( immune thrombocytopenia, ITP)患者外周血Th1、Th2、Th17和调节性T细胞(regulatory T cells, Treg)等CD4+T细胞亚群治疗前后的比例变化,并检测相应细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17、TGF-β及IL-10的浓度变化,探索CD4+T细胞亚群比率失衡在ITP发病机制中的作用。
方法:30例ITP患者根据有无治疗及治疗效果分为治疗前组、治疗后组(完全反应组20例、有效组6例、无效组4例),30例健康体检者设为对照组。流式细胞仪(FCM)检测ITP患者及健康对照者外周血Th1、Th2、Th17、Treg细胞分别占CD4+T细胞的百分率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血浆中IFN-γ、IL-4、IL-17及TGF-β、IL-10细胞因子浓度。分析ITP患者治疗前外周血CD4+T细胞亚群及相关细胞因子与血小板计数之间的相关性。
结果:1.ITP患者治疗前组外周血CD4+T细胞亚群百分率及细胞因子:治疗前组Th1、Th17细胞百分率及IFN-γ、IL-17水平较对照组升高(P<0.05);Treg细胞百分率及TGF-β、IL-10水平较对照组明显降低(P<0.01);IL-4水平低于对照组(P<0.05);Th1/Th2及Th17/Treg细胞比率高于对照组(P<0.05)。Th2细胞百分率与对照组比较,差异无统计学意义。
2.ITP患者外周血CD4+T细胞亚群百分率及细胞因子浓度在治疗前、后的变化:治疗后完全反应组Th1、Th17细胞百分率及IFN-γ、I1-17水平低于治疗前组(P<0.05);Treg细胞百分率及TGF-β、IL-10水平较治疗前组明显升高(P<0.05);IL-4水平较治疗前组升高(P<0.05)。有效组Th1、Th17细胞百分率及IFN-γ、IL-17水平与治疗前组比较,差异无统计学意义;Treg细胞百分率及TGF-β水平较治疗前组升高(P<0.05);IL-10水平与治疗前组比较,差异无统计学意义;I1-4水平较治疗前组升高(P<0.05)。无效组Th1、Th17、Treg细胞百分率及相应细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17、TGF-β、IL-10与治疗前组比较,差异无统计学意义。Th2细胞百分率在上述各组件比较,差异均无统计学意义。
3.ITP患者治疗后外周血CD4+T细胞亚群百分率及细胞因子浓度:完全反应组Th1、Th17、Treg细胞百分率及相应细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17、TGF-β、1L-10与对照组比较,差异均无统计学意义。有效组Th1、Th17细胞百分率及IL-17水平高于对照组(P<0.05);Treg细胞百分率及IL-10水平均低于对照组(P<0.05);IL-4水平低于对照组(P<0.05);IFN-γ、TGF-β水平与对照组比较,差异无统计学意义。无效组Th1、Th17细胞百分率及相应细胞因子IFN-γ、IL-17较对照组均升高(P<0.05);Treg细胞百分率及TGF-β、IL-10水平低于对照组(P<0.05);IL-4水平低于对照组(P<0.05)。Th2细胞百分率在上述各组间比较,差异均无统计学意义。
4.ITP患者治疗前组CD4+T细胞亚群之间相关分析:ITP患者治疗前组Th1细胞与Th17细胞之间成正相关性(r=0.55, p=0.01),其余各组ITP患者Th1、Th2、Th17、Treg细胞之间两两分析均无相关性。ITP患者治疗前组外周血浆IL-17、IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-10水平之间均无相关性。治疗前组患者血小板计数与CD4+T细胞亚群及相关细胞因子之间均无相关性。
结论:本研究结果表明,CD4+T细胞亚群失衡可能与ITP的发病有关,ITP患者治疗前Th1和Th17细胞之间存在正相关;治疗后CD4+T细胞亚群的变化可作为判断ITP治疗效果的一个项指标。