细胞周期相关基因微阵列的构建及其在中药筛选中的应用

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原发性肝癌(Hepatocarcinoma)是一种常见的恶性程度极高的肿瘤,在中国居于肿瘤死亡率第二位,为当前需要重点研究的疾病,因此筛选抗肝癌药物具有重要的现实意义.传统中药用于治疗癌症已有悠久的历史,中药治疗癌症具有多位点,副作用小等优点,但同时中药存在药效机制不明确和药方复杂等缺点,为中药抗癌治疗的研究带来了一定的困难.近年来随着细胞生物学和分子生物学对肝癌发生的本质的阐明,抗癌药物的研究水平有明显提高,中药治疗肝癌已显示出较大的优势,并得到广泛的应用.已证明细胞周期调控异常与肿瘤发生密切相关,该研究选择细胞周期与损伤检测相关的基因作为该文研究中药作用机理的靶点,制备了包含24个基因的cDNA微阵列,并检测了微阵列的各项参数,证明微阵列结果的可靠性.该研究选择了1 种具有抗肿瘤潜力的中药,以肝癌细胞系SMMC-7721细胞作为初筛模型,NIH-3T3成纤维细胞作为正常细胞检测药物的毒性,其中五种对SMMC-7721细胞抑制率高而对NIH-3T3细胞抑制率较低,分别为乌药(Radix Linderae)、紫草(Hebra Artemisiae Annuae)、黄芪(Radix Arnebiae)、青蒿(Radix Astragali)和远志(Radix Polygalne).同时该实验利用LOGIT法计算了每种药物的半数致死计量(IC50);通过荧光染色技术和流式细胞技术研究了五种中药作用的细胞学机理;并采用该实验设计的cDNA微阵列检测了中药作用细胞后对细胞周期和损伤检测相关基因转录的影响.五种中药作用SMMC-7721后,细胞周期基因和损伤检测点基因均有不同程度改变,部分基因表达上调,部分基因下调,这些和流式细胞术检测的结果是相符合的.同时该研究还对五种中药进行了初步的组合研究,通过设计正交抑制率试验获得了四种比较有效的组合,利用cDNA微阵列检测药物组合作用的分子学机理,发现不同组合作用后,基因表达有不同变化,但也有一定的规律,另外还研究发现黄芪是药物组合中一种比较有效的成分,这些结果,为我们科学的研究中药提供了一定的指导意义.
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