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目的:观察电针大肠俞募穴对慢传输型便秘(Slow transit constiPation,STC)大鼠肠道传输功能、结肠组织内胶质细胞源性神经营养因子(Glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)的表达以及GDNF基因启动子区甲基化水平的影响,为针刺俞募配穴治疗脏腑病这一经典用穴规律的临床应用与机理研究提供一定的科学依据。方法:将64只大鼠随机分为正常组16只、盐水组16只、造模组32只。造模组采用复方地芬诺酯混悬液灌胃法复制STC模型,正常组常规饲喂,不进行处理,盐水组采用同等剂量的生理盐水灌胃。模型建立成功后,造模组再次随机分为模型组16只、电针组16只。电针组予以双侧天枢、大肠俞同时针刺,电针治疗15min,1次/天,持续治疗14天,余组大鼠仅予以同法抓取及固定。观察各组大鼠的行为学与排便情况的改变;用肠道推进速度法检测各组大鼠肠道传输功能的变化;采用蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR法检测不同状态下大鼠结肠组织GDNF蛋白、mRNA的表达;采用BSP法检测GDNF基因启动子区的甲基化水平。结果:1行为学观察:(1)正常组与盐水组相比,其攻击、修饰、探究行为评分均未见明显差异(?????)。(2)与正常组、盐水组相比:模型组攻击、修饰、探究行为评分均明显上升(???);电针组攻击、探究行为评分具有统计学差异(????);修饰行为评分未见明显差异(?????)。(3)与模型组相比:电针组修饰、攻击、探究行为评分下降(????)。提示STC大鼠存在焦虑表现,电针治疗可总体改善STC大鼠的攻击、修饰、探究行为,但攻击、探究行为的改善程度较正常水平差。2排便情况:大鼠24小时排便重量以及粪便性状评分比较:处理结束后,正常组与盐水组相比无明显差异(?????);与正常组、盐水组相比,模型组排便量明显下降(???),粪便性状评分降低(????),电针组未见明显差异(?????);电针组与模型组相比,24小时排便量明显上升(???),其粪便性状评分增高(????)。提示STC大鼠排便量减少,粪便干结,电针大肠俞募穴可促进大鼠排便,改善其粪便质地干硬的症状。3肠道推进率比较:正常组与盐水组相比,肠道推进率差异无统计学意义(?????);与正常组、盐水组比较,模型组肠道推进率明显下降(???);电针组无统计学差异(?????);电针组与模型组相比,差异具有统计学意义(???)。提示STC大鼠肠道推进速度减慢,电针大肠俞募配穴可以提高STC大鼠的肠道推进速度,促进其肠道蠕动,改善肠道的传输功能。4结肠组织GDNF的表达:GDNF蛋白及GDNFmRNA的表达:正常组与盐水组相比,GDNF蛋白及GDNFmRNA的表达未见明显差异(?????);与正常组、盐水组相比,模型组GDNF蛋白及GDNFmRNA表达可见明显下降(???),电针组GDNF蛋白及GDNFmRNA的表达未见明显差异(?????);与模型组相比,电针组GDNF蛋白及GDNFmRNA的表达明显增加(????)。提示STC大鼠中结肠组织GDNF蛋白与mRNA表达减少,而针刺大肠俞募配穴可以提高STC大鼠结肠组织内GDNF蛋白与mRNA的表达水平。5结肠组织GDNF基因启动子区的甲基化水平:正常组与盐水组相比,其差异无统计学意义(?????);与正常组、盐水组比较,模型组GDNF基因启动子区的甲基化水平增加(????),电针组差异无统计学意义(?????);电针组与模型组相比,其差异具有统计学意义(????)。提示STC大鼠中结肠组织GDNF基因启动子区CpG甲基化水平上升,电针大肠俞募配穴可以降低其甲基化水平。生理盐水灌胃对该结果无明显影响。结论:1.电针大肠俞募穴可有效改善STC大鼠的便秘症状及肠道传输功能。2.电针大肠俞募穴通过调控GDNF基因启动子区的甲基化修饰状态,促进GDNF的表达,这可能是电针大肠俞募配穴能有效治疗STC的重要机制之一。