CCR3在嗜酸粒细胞增多型CRSwNP中的表达及发病机制中的作用观察

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目的:1.初步研究CCR3在嗜酸粒细胞增多型CRSw NP中的表达情况及其相关Th1/Th2细胞因子的作用。2.观察CCR3与相关Th1/Th2细胞因子在嗜酸粒细胞增多型CRSw NP发病机制中的作用。方法:选取30名在我院诊断为CRSw NP的患者,行HE染色,把嗜酸性粒细胞<10%浸润炎症细胞的15名患者纳入非嗜酸性粒细胞增多型CRSw NP组;把嗜酸性粒细胞≥10%浸润炎症细胞的15名患者纳入嗜酸性粒细胞增多型CRSw NP组,选取在我院确诊单纯鼻中隔偏曲行鼻中隔矫正手术的10名患者作为正常对照组(Control)。收集CRSw NP患者的鼻息肉组织和对照组的下鼻甲粘膜,免疫组化染色检测各组中CCR3、Eotaxin、ECP的表达情况,并用Elisa方法检测各组中CCR3、Eotaxin、ECP、Th1(TNF-α、IFN-γ、IL-12)及Th2(IL-4、IL-5、IL-13)细胞因子的浓度变化。另取3例嗜酸性粒细胞增多型CRSw NP(ECRSw NP)和3例非嗜酸性粒细胞增多型CRSw NP(NECRSw NP)患者的鼻息肉组织进行体外组织培养,分别培养24小时,各分为3组,A组:原培养液中不加任何刺激剂;B组:加入CCR3激动剂(Eotaxin)10ng/m L、100ng/m L、1000ng/m L;C组:加入CCR3抑制剂(SB-328437)10n M、100n M、1000n M,使用Elisa法检测培养液中ECP、Th1(TNF-α、IFN-γ、IL-12)、Th2(IL-4、IL-5、IL-13)细胞因子的表达。结果:⑴在ECRSw NP组的HE染色中可见大量的炎症细胞浸润,以嗜酸性粒细胞为主;而在NECRSw NP组中主要以淋巴细胞、浆细胞或中性粒细胞为主;在对照组中可见少量淋巴细胞及浆细胞浸润,偶见嗜酸性粒细胞。⑵免疫组化染色显示CCR3、Eotaxin、ECP在ECRSw NP组中明显升高,与对照组和NECRSw NP组相比,具有统计学意义(P<0.05);CCR3、ECP在NECRSw NP组中明显升高,与对照组相比,具有统计学意义(P<0.05);⑶在各组中Elisa分析发现,(1)与对照组和NECRSwNP组相比,Eotaxin、ECP在ECRSw NP组中显著升高且有统计学意义(P<0.05),但NECRSw NP组与对照组相比无显著差异(P>0.05)。(2)与对照组相比,CCR3在ECRSw NP组中明显升高且具有统计学意义(P<0.05),与NECRSw NP组相比CCR3在ECRSw NP组中是升高的,但尚无统计学意义(P>0.05)。(3)与ECRSw NP组和对照组相比,IFN-γ在NECRSw NP组明显升高,具有统计学意义(P<0.05),ECRSw NP组和对照组相比无明显差异。(4)与对照组相比,IL-13在ECRSw NP组和NECRSw NP组中明显升高,且有统计学意义(P<0.05),但在ECRSw NP组和NECRSw NP组中差异不明显(P>0.05)。(5)与NECRSw NP组和对照组相比,TNF-α、IL-4、IL-5在ECRSw NP组中明显升高,均具有统计学意义(P<0.05),但NECRSw NP组和对照组相比无明显差异,即不具有统计学意义(P>0.05)。⑷在鼻息肉组织体外培养中,Elisa分析发现在不同浓度CCR3激动剂和抑制剂的作用下,A、B、C三组进行比较发现,ECP、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-5、IL-12、IL-13的分泌在三组间无明显差异(P>0.05)。结论:1.CCR3在ECRSw NP患者的表达中显著升高,表明CCR3在ECRSw NP的发病机制中产生作用。2.在ECRSw NP患者中,以Th1/Th2混合型炎症为主;而在NECRSw NP患者中,以Th1型炎症为主。3.鼻息肉组织体外培养结果显示调控CCR3未影响Th1/Th2型细胞因子的表达,表明在ECRSw NP发病机制中CCR3可能未通过调控Th1/Th2细胞因子而产生作用。
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