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目的：
1．利用大肠杆菌Rosetta2(DE3)表达鼠热休克蛋白(heatshockprotein)110，为复合物的构建提供实验基础。
2．利用标准Fmoc方案合成人乳头瘤病毒(Humanpapillomavirus，HPV)16型E7抗原的人白细胞抗原A2分子限制性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位（第11-20位氨基酸）及其标记异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate，FITC)的E711.20，同样是为复合物的构建提供实验基础。
3．将纯化的HSP110与肽E711-20在热休克状态下形成复合物，免疫HLA-A*0201转基因小鼠，采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法，检测其细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的杀伤力，进一步探讨该复合的免疫原性。为证明HSP110是否能提高抗原肽E711-20的免疫原性，为高危型HPV16感染预防性疫苗和治疗性疫苗的研制提供实验基础。
方法：
1．用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达；十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Westernblot)鉴定mHSP110蛋白表达。
2．采用异硫氢酸荧光索(FITC)标记的E711-20肽及E711-20肽与mHSP110在热休克状态下结合，进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)后，电泳胶在荧光成像仪下成像后，再将同一块凝胶用考马斯亮蓝染色，观察条带情况，从而证明mHSP110与抗原肽的结合。
3．将PBS，mHSP，E711-20，mHSP110-E711-20抗原肽复合物通过腹腔注释，免疫HLA-A*0201转基因小鼠，每组5只，于0、1、2周共注射3次。最后一次免疫后两周，脱颈处死小鼠，无菌条件下获得脾细胞，制备成效应细胞。采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法，检测其细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的杀伤力。
结果：
1．经过SDS-PAGE和Westernblot鉴定出了mHSP110的正确表达。
2．合成的候选表位多肽经RP-HPLC纯化及纯度分析，合成肽的纯度均大于90％，用FITC标记的E711.20肽证明了该复合物连接成功。
3．MHSP110-E711.20抗原肽复合物免疫小鼠后，该复合物能诱导出肿瘤特异性的CTL。复合物组的脾细胞在效靶比分别为12.5:1；25:1；50:1对T2细胞的杀伤率分别为(4.530±0.610)％、(21.780±1.716)％、(48.220±1.227)％，明显高于相对应的PBS组的(1.227±0.202)％、(2.113±0.192)％、(3.473±0.246)％;HSP110组的(1.336±0.322)％、(2.150±0.445)％、(3.987±4.497)％;E711.20组的(1.863±0.489)％、(3.800±0.700)％、(5.563±1.093)％;复合物组与其他三组分别比较，差异均有统计学意义(P＜0.01)；其他三组相互比较，差异无明显的统计学意义(P＞0.05)。
结论：
1.成功表达和纯化了热休克蛋白110。
2．通过标准Fmoc方案成功合成了多肽E711-20，及荧光标记肽FITC-Ahx-E711.20。HSP110在热休克状态下以非共价形式成功连接了E711-20。
3．重组表达的mHSP110在一定条件下可以在体外与抗原肽E711-20形成复合物，且该复合物的免疫原性明显高于单肽的作用。