前言 整合素是调节细胞-细胞、细胞-ECM之间相互作用的糖蛋白受体家族。所有整合素都是由一个α亚单位和一个β亚单位组成的杂二聚体形式的跨细胞膜糖蛋白,每一整合素亚单位在结构上均分成三部分:与ECM蛋白相互作用的细胞外结构域、与细胞骨架蛋白相互作用的细胞内结构域以及跨细胞膜结构域。大多数整合素细胞外结构域相对较大而细胞内结构域相对较小。整合素细胞外结构域与ECM中相应蛋白配体结合后将导致信号复合体的形成,对调解细胞生长、存活、增殖以及基质塑型等具有重要作用。关节软骨细胞主要表达整合素α5β1,其正常表达对维持细胞存活具有重要作用。关节内注射HA已经被用于OA的治疗。多项研究报道HA在OA疾病进展过程中对关节软骨具有保护作用。为进一步阐明HA对软骨细胞的作用,本实验检验了HA对体外培养软骨细胞整合素α5亚单位表达的影响,探索HA保护软骨细胞的作用机制。 材料和方法 本实验首先无菌条件下收集截肢手术患者关节软骨,以0.2%Ⅱ型胶原酶消化切碎的软骨组织碎片,收获软骨细胞进行体外培养。利用Ⅱ型胶原抗体对所制备的细胞爬片进行免疫细胞化学染色,鉴定软骨细胞。然后以HA处理体外培养的关节软骨细胞,应用免疫细胞化学技术,检测HA作用后体外培养的关节软骨细胞整合素α5亚单位的表达。最后应用显微图像分析软件对染色后的软骨细胞爬片进行灰度分析,比较实验组和对照组整合素表达的差异。