【摘 要】
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背景:随着心血管疾病及外周动脉疾病数量的增多,自体移植血管已经满足不了临床需求,寻找商品化小口径血管移植物成了临床上的迫切需要。体外组织工程化血管的构建技术已经日趋成熟,但商品化工程血管很难来源于自体细胞,更多的血管组织移植物还属于异系甚至异种组织移植。理论上脱细胞处理可以降低组织的免疫原性,但脱细胞处理后的异系血管组织还会残留一定的组织反应,其程度将影响组织工程血管移植后的中远期通畅率。目前,有
【基金项目】
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广东省高水平医院“登峰计划”科研专项;
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背景:随着心血管疾病及外周动脉疾病数量的增多,自体移植血管已经满足不了临床需求,寻找商品化小口径血管移植物成了临床上的迫切需要。体外组织工程化血管的构建技术已经日趋成熟,但商品化工程血管很难来源于自体细胞,更多的血管组织移植物还属于异系甚至异种组织移植。理论上脱细胞处理可以降低组织的免疫原性,但脱细胞处理后的异系血管组织还会残留一定的组织反应,其程度将影响组织工程血管移植后的中远期通畅率。目前,有关脱细胞异系血管组织移植后的组织反应研究还非常少。目的:以大鼠主动脉血管组织作为材料,观察脱细胞同种异系大鼠皮下移植后的组织反应情况,评价脱细胞处理对异系移植后引起的组织反应程度。方法:采用CHAPS联合SDS双除垢剂脱细胞大鼠主动脉,进行苏木精-伊红染色,Picogreen分析细胞DNA残余量,评价脱细胞效果;通过直接接触试验对所制备的脱细胞血管进行体外细胞毒性分析;将32只Wistar大鼠分为4组,每组8只。手术处理每只动物背部两侧组织形成囊袋,同种异系皮下移植脱细胞Sprague-Dawley鼠主动脉(实验组)及非脱细胞Sprague-Dawley鼠主动脉(对照组),每组均有Wistar鼠主动脉作为自体血管移植对照,于术后4个时间点(1、7、14、28天)分别处死整组动物,进行组织学和形态学分析。用半定量方法评价细胞浸润程度、多核巨细胞的存在、血管生成、脂肪浸润和纤维化程度等,通过CD3和CD68免疫组化染色定性浸润细胞种类,根据移植天数对局部组织反应进行分析。结果:苏木精-伊红染色显示脱细胞血管支架无细胞成分残留,保持较完整的细胞外基质成分;Picogreen分析脱细胞血管支架DNA含量显著降低;直接接触细胞毒性试验表明脱细胞支架与人主动脉外膜成纤维细胞有良好的相容性,细胞毒性为0级;皮下植入后组织反应的半定量评分显示脱细胞鼠主动脉始终保持着无刺激状态,非脱细胞鼠主动脉呈现重度刺激向无刺激的演变过程;在整个移植过程中,同种异系脱细胞鼠主动脉始终保持着与自体血管移植组相似的组织反应及组织重塑结果。非脱细胞鼠主动脉显现出明显的急性炎症反应(第1天及第7天)、多核巨细胞浸润(第7天及第14天)、脂肪细胞浸润(第28天)。结论:1.双除垢剂处理大鼠主动脉可获得良好的脱细胞血管支架,血管结构未造成破坏,且细胞毒性不明显。2.脱细胞处理后的异系血管组织仍残留一定的组织反应,但这种组织反应结果基本接近自体血管组织皮下移植的结果。
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