甲状旁腺激素相关肽(1-141和1-86)编码序列的克隆与表达

被引量 : 0次 | 上传用户:tanmh
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
甲状旁腺激素相关肽(PTH-related peptide,PTHrp)首先是在伴有恶性高钙血症的恶性肿瘤患者的血液中发现的,它与甲状旁腺激素(PTH)在生理功能上有很大的相似性,二者在N端的前13个氨基酸中有10个是完全一样的。PTHrp在机体的各种组织器官内广泛表达,但表达量却很低。PTHrp是一种多功能激素,在包括心血管、泌尿、神经系统在内的几乎所有生理系统都能发挥其特定的功能。 我们从人血细胞中提取基因组DNA,并以之为模板,PCR扩增PTHrp1-141编码序列,并将此序列克隆入非融合型表达载体pBV220及融合型表达载体pET-42a中。经表达条件优化后,重组表达载体pBV220/PTHrp1-141在E.coli DH5α的表达量仍然很低。重组表达载体pET-42a/PTHrp1-141和pET-42a/PTHrp1-86在E.coli BL21(DE3)的表达产物主要存在于包涵体中,占菌体蛋白总量的30%以上。经Western Blotting鉴定,融合表达产物GST-PTHrp1-141和GST-PTHrp1-86具有PTHrp免疫活性。包涵体复性后,首先经Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化,然后利用因子Xa切去担体蛋白GST,最后通过超滤进一步纯化和浓缩产物。重组PTHrp1-141与PTHrp1-86的分子量分别约为18KD和13KD。通过检测MG63细胞内cAMP浓度,我们可知重组PTHrp1-141与PTHrp1-86具有生物活性,而且,后者活性略高于前者,但都明显低于hPTH1-34
其他文献
本文主要研究马尾松板材的脱脂工艺、脱脂后马尾松板材的干燥工艺以及处理材和素材的材性对比。脱脂工艺研究主要采用化学药剂浸泡脱脂、化学药剂汽蒸脱脂和汽蒸干燥脱脂三种
本文针对酒精发酵行业现有废糟液治理技术存在设备投资大、运行能耗高的突出缺点,以玉米粉为原料,双酶法制糖,在自絮凝颗粒酵母酒精连续发酵系统中耦合了废糟液直接全循环使
运用仿生技术解决粘附问题是一条行之有效的途径。本文是根据工程仿生学原理,利用某些典型生物具有减粘脱附的特性,进而设计开发仿生防粘鞋底。研究内容属于机械工程以及与生
左旋咪唑为咪唑并噻唑类广谱驱虫药,具有潜在的基因毒性,我国农业部规定以母体药物形式表现的最高残留限量(MRL),在牛、羊、禽类和猪的肌肉、肾脏及脂肪中为10μg/kg,在肝脏中为10
针对给排水设计中给水管道、排水管道、地漏水封、水表位置设置消防、立管敷设等方面存在的问题进行了分析,并提出了相应的建议,以指导实践,促进给排水设计水平的提升。
网络远程控制系统的出现体现了自动控制技术与计算机网络技术的学科的交叉,网络技术在社会各个领域已经得到了广泛的应用,其在控制领域的应用,本质上是计算机网络技术向自动化控
班主任作为学校实施教育教学最基础的管理者,不仅是协调校内各种教育力量的纽带,也是学生与学校、家庭、社会沟通的桥梁,同时还是学生健康成长、全面发展的指导者和领路人。
随着养老保险制度从现收现付制向部分积累制的转换,我国的养老保险基金规模日益增大。养老保险基金是一种长期货币支付计划,必然受到通货膨胀的影响。上个世纪末以来我国人口老
明星对社会舆论及行为具有导向作用。近年来,随着大量的选秀节目、影视新作、网络作品等不断地推出,明星的身影也出现在越来越广的领域,现代明星的传播效应也发生着深刻的变
一、  绪论 压电泵是将压电体激发的振动直接作用于流体,使其产生动压或流量输出的一种新型压电驱动机构。是流体输送系统的重要组成部分和研究热点之一。由于压电泵具有结