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目的:褪黑素受体是潜在的缺血性脑损伤治疗靶点,雷美替胺是一种比内源性褪黑素效价更高的选择性褪黑素受体激动剂,临床用于失眠症的治疗。本研究探讨雷美替胺是否具有抗缺血性脑损伤作用,并初步探索其作用机制。方法:选择C57BL/6小鼠进行永久性大脑中动脉阻塞(permanent middle cerebral artery occlusion,pMCAO)手术建立急性脑缺血动物模型。在pMCAO手术完成时分别灌胃给予小鼠雷美替胺0.33,1,3 mg/kg,手术后24小时检测药物作用指标(脑梗死体积统计和神经症状评分);灌胃给予雷美替胺3 mg/kg,腹腔注射给予褪黑素受体拮抗剂4-P-PDOT 3 mg/kg或同时给予两种药物,考察雷美替胺作用是否被褪黑素受体拮抗剂拮抗;分别腹腔注射给予3,10,30mg/kg依达拉奉(急性脑梗死治疗药物),寻找其在本实验模型中的最佳剂量。在pMCAO手术完成时、手术后4 h、6 h灌胃给予雷美替胺3 mg/kg或腹腔注射依达拉奉10 mg/kg,考察雷美替胺作用时间窗,并比较雷美替胺和依达拉奉的抗脑缺血损伤药效。选择C57BL/6小鼠进行光化学栓塞手术建立长期脑缺血动物模型。在血栓形成后7天每天灌胃给予雷美替胺3 mg/kg或同时注射给予4-P-PDOT 3 mg/kg;每隔一天进行圆筒实验检测小鼠的运动功能,进行网格实验检测小鼠精细运动协调能力;在缺血15天后以甲苯胺蓝染色检测小鼠脑梗死体积。在pMCAO术后分别给予小鼠雷美替胺3 mg/kg、4-P-PDOT 3 mg/kg或同时给予两者,手术24 h后通过免疫印迹实验检测细胞自噬标志蛋白(SQSTM1、LC3-II)及自噬信号通路蛋白(AMPK、p-AMPK、p-mTOR、p-p70S6)的表达。pMCAO手术后即刻给予雷美替胺3 mg/kg或同时脑室内注射自噬激活剂雷帕霉素20 pmol,观察自噬激活剂对雷美替胺作用的影响。在小鼠光栓造模后7天每天灌胃给予雷美替胺3 mg/kg或同时注射给予4-P-PDOT 3 mg/kg,15天后检测细胞自噬标志蛋白及自噬信号通路蛋白的表达。结果:pMCAO手术后即刻灌胃给予小鼠雷美替胺3 mg/kg可以显著降低脑梗死体积和神经症状评分,同时该保护作用可以延长到手术后4小时。给予褪黑素受体拮抗剂4-P-PDOT 3 mg/kg,可以逆转雷美替胺的保护作用。我们发现给予依达拉奉10 mg/kg时脑梗死体积及神经症状缺损评分减少最为显著。雷美替胺3mg/kg与依达拉奉10 mg/kg相比,脑梗死体积和神经症状评分均无统计学差异,并存在相似的有效时间窗。雷美替胺3 mg/kg显著减少小鼠光化学栓塞脑缺血15天后的脑梗死体积,并明显降低了错步率和前肢不对称率。同时其保护作用同样可以被给予4-P-PDOT所逆转,表现为脑梗死体积、错步率和前肢不对称率显著升高。免疫印迹实验结果显示,p MCAO手术缺血24小时后,给予雷美替胺可以显著降低自噬标志蛋白水平(SQSTM1、LC3-Ⅱ)和相关信号通路激活水平(p-AMPK、p-mTOR、p-p70S6),同时被4-P-PDOT所逆转。手术后给予雷帕霉素,可以显著逆转雷美替胺的保护作用。光化学栓塞小鼠缺血后15天,雷美替胺同样可以降低自噬标志蛋白水平(SQSTM1、LC3-Ⅱ)和相关信号通路激活水平(p-AMPK、p-mTOR、p-p70S6),上述作用同样可以被4-P-PDOT逆转。结论:雷美替胺对小鼠缺血性脑损伤具有神经保护作用,其药效和有效时间窗与依达拉奉相当,提示雷美替胺可作为脑卒中的潜在治疗药物。雷美替胺可能通过激动褪黑素受体,进而抑制缺血诱导的自噬发挥作用。