体外培养条件对延边黄牛卵母细胞及胚胎形态和发育能力影响

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本试验以延边黄牛为研究对象,抽取卵巢表面3~8mm卵泡中的卵母细胞,进行体外成熟培养(IVM)、体外受精(IVF)和受精卵体外培养(IVC)研究,同时采用组织化学技术和电子显微镜技术,对发育各期延边黄牛早期胚胎的一般形态结构、脂质含量变化及超微结构特征进行了观察,结果如下:  1、延边黄牛卵母细胞体外成熟培养过程中,适量添加促卵泡素(FSH)、雌二醇(E2)能显著提高卵母细胞成熟率,同时卵巢质量对卵母细胞的成熟率和卵裂率有明显影响;胎牛血清(FBS)、孕马血清(PMSG)对延边黄牛卵母细胞的体外成熟和卵裂均有促进作用;添加0.095mg/mL半胱氨酸能显著提高延边黄牛卵母细胞体外成熟率和卵裂率。  2、肝素钠(Heparinum)与咖啡因(Caffeine)协同作用可提高延边黄牛精子体外获能效果及体外受精率。另外,以 BO液为基础液,结合使用肝素钠(20μg/mL)、BSA(0.006g/mL)可显著提高延边黄牛精子外获能效果及体外受精率。  3、CRI-aa培养体系可有效提高延边黄牛早期胚胎体外发育能力。  4、延边黄牛卵母细胞体外成熟培养后细胞内脂质含量增多,4细胞期胚胎内脂滴最大,8细胞期后胚胎胞质内脂滴变小且变少。  5、延边黄牛早期胚胎各发育期均有线粒体、空泡存在,且2~8细胞期以帽状线粒体为主,8细胞期后帽状线粒体和棒状线粒体共存。高尔基体随着细胞的发育有退化趋势。
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