论文部分内容阅读
目的1．研究芳香化酶基因（CYP19）第四内含子△3（TTTA）n微卫星多态性与多囊卵巢综合征发病之间的关系，同时研究其与PCOS患者体重指数及血清生殖激素之间的关系。2．研究胆固醇侧链裂解酶基因（CYPllα）启动子中（TTTTA）n微卫星多态性与多囊卵巢综合征发病之间的关系，同时研究其与PCOS患者体重指数及血清生殖激素之间的关系。3．研究过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator-activatedreceptor,PPAR）基因中Pro12Ala多态性和过氧化物酶增殖体激活受体γ共激活蛋白1（peroxisome proliferator activated receptorγcoactivator-1,PGC-1）基因Gly 482 Ser多态性与PCOS发病的相关性，及其与PCOS高雄激素（血清睾酮）之间的关系。
方法1．收集PCOS和对照的血样标本（201例PC08患者和147例非PCOS对照者），放射免疫法测定血清中的生殖激素。2．采用Chelex－100提取法从外周血标本中提取DNA。3．芳香化酶基因（CYP19）第四内含子△3（TTTA）n微卫星多态性、胆固醇侧链裂解酶基因（CYP11α）启动子中（TTTTA）n微卫星多态性：特异引物聚合酶链反应，产物经6％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，银染检测。4．过氧化物酶体增殖物激活受体（pemxisome proliferator-activated receptor,PPAR）基因中Pro12Ala多态性，过氧化物酶增殖体激活受体γ共激活蛋白1（pemxisome proliferator activated receptor γcoactivator-1,PGC-1）基因Gly 482 Set多态性：特异引物聚合酶链反应，产物经限制性酶切，2％琼脂糖凝胶电泳分离，EB染色。
结果1．CYPl9中△3（TTTA）n的结果：PCOS的A3（TTTA）n频率分布：（TTTA）13为0.002777，（TTTA）12为0.083333，（TTTA）11为0.352777，（TTTA）10为0.002777，（TTTA）8为0.002777，（TTTA）7为0.297222，A3（TTTA）7为0.258333；正常对照的△3{TTTA）n频率分布为：（TTTA）13为0.007874，（TTTA）12为0.074803，（TTTA）11为0.370078，（TTTA）10
为0.003937，（TTTA）8为0.015748，（TTTA）7为0.287401，△3（TTTA）7为0.240157。正常对照和PCOS患者之间的△3（TTTA）n频率分布没有统计学差异。二者都没有（TTTA）9。 2．CYP11a中（TTTTA）n的结果：PCOS女性CYP11a中（TTTTA）n的频率分布与对照女性该位点的频率分布差异显著（FisherS Exact Test（2-Tail），p=0.031）。该差异主要是由于PCOS患者中基因型（TTTTA）6//（TTTTA）6的频率显著大于对照女性该基因型的频率（57.7％和32.8％；X〈2〉=5.588，p=0.018）。基因型为4//4的患者的BMI显著低于其他基因型患者的BMI（4//6，6//6和6//8基因型；P分别等于0.0037，0.0027，0.059）。而且含有等位基因（TTTTA）6的患者的BMI显著大于不含有该等位基因的患者（p=0.0075）。血清T及其他生殖激素在不同基因型之间没有显著差异。等位基因（TTTTA）6是中国汉族女性最常见的片段。
3．中国人PPAR-γ2中Ala等位基因频率较低（4.4％），但PGC-1α的频率较高（48％）。PCOS病人的PPAR-γ2（Pro12Pro,Pro12Ala and Alal2Ala）基因型分布（0.910，0.090，0，respectively）与正常人的分布（0.925，0.068，0.007，respectively）无显著差异。PCOS病人的PGC-1α（Gly482Gly,Gly482Ser and Ser482Ser）基因型分布（0.328，0.402，0.269，respectively）与正常人的分布（0.333，0.374，0.293，respectively）无显著差异。BMI、血清总睾酮T和其他生殖激素如：FSH，LH，LH/FSH，Pand E2在PPAR-γ2 and PGC-1α各基因型之间无显著差异。
结论1．CYPl9基因第四内含子的多态性与PCOS发病之间没有直接相关性，PCOS的雄激素升高不是其代谢下降，而是合成过多。2．基因型（TTTTA）6//（TTTTA）6与PCOS发病相关，等位基因（TTTTA）6与PCOS患者大的BMl相关。等位基因（TTTTA）6在中国女性PCOS发病机理中起一定作用。3．我们认为PPARγ2 Prol2Ala and PGC-1α Gly482Ser这两种单核苷酸多态性与PCOS的发病无相关性。