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背景和目的：绒癌是发生于育龄女性的高度恶性实体瘤,对化疗敏感。发生化疗耐药是其治疗失败的主要原因。深入了解绒癌耐药机制以逆转绒癌耐药具有重要临床意义。自噬是细胞应对代谢压力的重要分解反应,降解细胞中去折叠或聚合的蛋白和细胞器等大分子物质,维持细胞内稳态,与多种疾病的发生发展密切相关。有研究证实自噬促进肿瘤细胞对化疗耐药,抑制自噬可能逆转肿瘤耐药。C1QBP是一种多功能蛋白,本课题组前期研究已发现C1QBP在绒癌耐药细胞株中表达高于敏感细胞株,并以调节细胞自噬的方式参与绒癌耐药,沉默C1QBP表达可能作为自噬的抑制子用于逆转绒癌耐药。本研究拟探讨C1QBP与蛋白降解及选择性自噬的关系,并通过动物实验进一步探讨C1QBP参与绒癌耐药的相关机制。研究方法：构建靶向C1QBP基因的shRNA慢病毒表达载体,慢病毒稳定转染绒癌耐药细胞干扰CIQBP表达；蛋白免疫印迹法(western blot)检测C1QBP RNA干扰效率；CCK-8法检测干扰C1QBP前后绒癌耐依托泊苷(VP16)耐药细胞株Jeg3/VPC IC50及耐药指数(RI)的变化；行细胞裸鼠皮下成瘤,腹腔注射MTX或VP16,观察肿瘤体积和重量变化,构建绒癌体内化疗耐药动物模型,检验沉默C1QBP表达对绒癌细胞体内耐药性的影响；并同时在细胞和裸鼠皮下移植瘤组织中检测自噬特异性受体蛋白p62与C1QBP的共表达。研究结果：成功构建C1QBP shRNA慢病毒表达载体并转染绒癌耐药细胞株Jeg3/VPC,获得C1QBP RNAi高效抑制的细胞,基因沉默效率随细胞传代递减；沉默Jeg3/VPC CIQBP表达显著降低细胞VP16IC50及RI(P<0.05),其耐药性下降比例达92.86%；C1QBP基因敲除(Knock down, KD)组细胞在裸鼠体内成瘤延迟,与对照组细胞相比C1QB KD组细胞VP16作用后体积抑瘤率和重量抑瘤率均升高；在体外培养细胞中,沉默C1QBP表达伴随p62表达上调,且P62结构表型发生变化；裸鼠皮下移植瘤组织中均检测出自噬相关蛋白p62与C1QBP的表达。结论：沉默绒癌耐药细胞株Jeg3/VPC中C1QBP表达,在体外及体内水平均对细胞增殖起抑制作用,并在一定程度逆转其对VP16的耐药性。C1QBP可调节P62表达,可能以调节细胞内蛋白降解及选择性自噬的方式参与绒癌耐药。