四川辣椒疫霉菌分离、鉴定及辣椒根系分泌物与辣椒疫病抗性的关系

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辣椒疫病是由辣椒疫霉菌(Phytophthora capsiciL.)侵染引起的一种世界性土传病害,是影响辣椒生产的主要因素之一。研究从四川米易、崇州、内江三个不同的辣椒主产区分离和鉴定辣椒疫霉菌,以疫病抗性品种’兴蔬215’和感病品种‘二金条’为试验材料,以从内江搜集到的菌株NJ-5为致病菌,研究了不同培养条件下的根系分泌物差异,人工接种后根系分泌物组分的变化,比较了感病品种和抗病品种根系分泌物差异。进而通过这些结果初步判定根系分泌物与辣椒疫病抗性的关系。本研究根系分泌物的提取方法为液相萃取,使用GC-MS进行鉴定。主要研究结果如下:1.不同地区采集分离的病原菌菌落形态基本相同,呈白色和放射状,但菌落生长速度有差异。进而在显微镜下对菌丝、游动孢子、游动孢子囊进行形态学鉴定,以及对核糖体RNA转录间隔区(Internal transcribed spacer,ITS)长度进行PCR鉴定。最终确定12个辣椒疫霉菌疑似菌株。优化了辣椒疫霉菌的保存条件。用液体石蜡封存斜面培养基5mL,于16℃下保存,可有效封存60d。优化了辣椒疫霉菌的游动孢子接种方法。先在在PDA培养基上24h不间断光照6d,诱导产生游动孢子。接着,对6叶期的水培辣椒按照5×104个/mL的浓度进行接种,在25℃下培养10d。2.从抗、感辣椒品种培养50d后的营养液中收集根系分泌物。共鉴定出9大类,50种物质,其中包括烃类、酸类、醛类、醇类、酯类、苯类、酚类、胺类、杂环化合物。其中,辣椒‘兴蔬215’根系分泌物中含有9大类,29种物质;‘二金条’根系分泌物中共含有8大类,24种物质。酯类物质为根系分泌物主要组成,其次为烃类。另外,水培条件下的辣椒具有与土培辣椒不同的根系分泌物。3.接菌后,培养液中可溶性糖含量与抗病性呈负相关;可溶性蛋白含量与辣椒疫病抗性呈负相关。表明根系分泌物中可溶性糖及蛋白含量差异可能与疫病抗性有关。比较接菌前后根系分泌物的变化,并对感病品种和抗病品种进行比较。结果,接菌后烃类物质的相对含量与试验中辣椒品种的抗病能力呈正相关;酯类和醛、酮类物质的相对含量与试验辣椒品种抗病能力负相关。具体地,奥苷菊环、正十八烷、正二十一烷等等物质与辣椒疫病抗病性正相关;2-甲基萘、3-正丁烯基苯酞、2,6-二叔丁基对甲酚等物质与辣椒疫病抗性负相关。
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