乳酸菌对牙鲆粘液的粘附、对致病菌的粘附抑制及体内定植的研究

来源 :大连水产学院 大连海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhaojie25
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该文用同位素(H<3>)标记法和异硫氰酸荧光素(FITC)标记法研究了两种乳酸菌(L<,1>来自牙鲆肠道,L<,2>为干酪乳杆菌)在牙鲆体表和消化道粘液的粘附及其对四种致病菌的粘附抑制作用和牙鲆体内定植情况,同时研究了生长状况及培养基pH的变化及体外抑菌作用.结果表明乳酸菌在牙鲆体表和消化道粘液中均有粘附性,并能在消化道中定植.两种方法结果均表明L<,2>在牙鲆体表和消化道的粘附能力均强于L<,1>,在胃的粘附效果最好,其余部位差异不显著.荧光素标记法测得L<,1>和L<,2>均在牙鲆胃内的粘附百分率最高分别是48.18%和63.0%.粘附抑制试验显示L<,1>对白色念珠菌(Candida albicans)在各部位均无粘附抑制作用,对荧光假单胞菌(P.Fluorescens)粘附抑制作用最强,使其在牙鲆消化道粘液的粘附百分率下降了19.01%,其余依次为非01型霍乱弧菌(V.cholerae non-01strains)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),分别降低了5.22%、3.22%.L2对非01型霍乱弧菌粘附抑制效果最好,使其粘附百分率降低了22.31%,使荧光假单胞菌、嗜水气单孢菌和白色念珠菌分别下降了17.50%、12.69%、5.15%.L<,1>在25h-75 h期间为指数增长期,75h后进入稳定期;L<,2>在48h前为指数增长期,48h后进入稳定期.两种菌都引起pH的降低,L<,2>的pH值变化较L<,1>明显.乳酸菌培养液上清液对非01型霍乱弧菌、荧光假单胞菌的抑制效果明显,对嗜水气单胞菌和白色念珠菌无抑制作用.通过投喂含有1.2×10<9>个/g乳酸菌的饲料,牙鲆消化道内的L<,1>和L<,2>均能在第5天时达到10<6>个/g以上,在投喂含菌饲料的实验过程中,乳酸菌含量维持在10<6>-10<8>个/g动态平衡中.L<,1>和L<,2>在牙鲆体内定植无种属特异性.在定植实验过程中随着乳酸菌的含量的增加弧菌逐渐降低,乳酸菌含量达最高值时弧菌含量降到最低,停喂7天后乳酸菌含量下降,弧菌数量有所回升.每天按15mg/kg体重投喂盐酸环丙沙星药饵,处理7天后,鱼体内所测定的3类细菌数均下降了10<1>-10<2>,随后的投喂L<,1>和L<,2>带菌饲料,结果证实处理后成鱼消化道较未处理组利于乳酸菌的定植,定植数量显著高于未投喂药饵组(p<0.01),利于成鱼消化道菌群的重建,但不影响乳酸菌定植的时间.
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