目的:耳聋是当今世界的主要问题之一,它严重降低了人们的生活质量。约50%的耳聋是由遗传因素导致,遗传性耳聋分为综合征型和非综合征型,迄今为止已鉴定123个非综合征型耳聋相关基因。通过对耳聋家系成员进行遗传学检测,可以进行早期诊断和遗传咨询;同时可以发现新的耳聋基因,为新的耳聋发生机制及耳聋疾病的诊疗提供依据,扩展对耳聋的认识。本研究对三例非综合征型耳聋家系进行遗传学检测,以找出致病基因和突变,分析其致病机制并对患者进行遗传学咨询。方法:对三例耳聋家系成员进行病史采集、听力及体格检查,绘制家系图。对家系成员进行遗传学检测,采用Sanger测序进行四个耳聋基因（GJB2、SLC26A4、GJB3和MT-RNR1）的21个常见位点检测;如未见突变,则利用高通量测序对这四个耳聋基因进行全测序;如四基因全序列没有致病突变,则进行全外显子检测（WES）和耳聋基因Panel-V3检测,并对检测结果进行分析和验证;在UCSC上分析突变位点的保守性,并通过Real-time PCR（RT-PCR）检测新突变基因的mRNA在不同发育时期C57BL/6J小鼠耳蜗组织中的表达情况。结果:1.家系1中检出Ⅱ、Ⅱ-2、Ⅱ-4携带线粒体基因MTRNR1（1555A＞G）突变,Ⅲ-1为突发性耳聋,治疗后好转,未检出突变基因。2.家系2来自于三个家庭,家庭a中检出Ⅱ-2携带GJB2（c.235delC,c.299-300delAT）复合杂合突变;家庭b中检出Ⅱ-5携带SLC26A4（c.279T＞A,c.1264-12T＞A）复合杂合突变,其父I-3携带c.279cT＞A,其母Ⅰ-4携带c.1264-12T＞A,Ⅱ-5的两个突变分别来自其父母;家庭c中检出Ⅱ-6携带SLC26A4（c.919-2A＞G,c.1336C＞T）复合杂合突变,其父I-5携带c.919-2A＞G,其母Ⅰ-6携带c.1336C＞T,Ⅱ-6的两个突变分别来自其父母。3.家系3中发现POLR1D c.52A＞G（pM18V）新突变,保守性分析显示POLR1D基因第18位甲硫氨酸（M18）高度保守,RT-PCR结果显示Polr1d的mRNA在各个发育时期的小鼠耳蜗中均有表达。结论:家系1检出MTRNR1基因1555A＞G突变,此突变可能为该家系耳聋的遗传学原因;家系2中,GJB2（c.235delC,c.299-300delAT）复合杂合突变可能为家庭a的遗传学原因;SLC26A4（c.279T＞A,c.1264-12T＞A）复合杂合突变可能是家庭b的遗传学原因;SLC26A4（c.919-2A＞G,c.1336C＞T）复合杂合突变可能为家庭c的遗传学原因;Ⅱ-5和Ⅱ-6（夫妻）如生育二胎仍为SLC26A4突变,耳聋的概率几乎100%,其它家系成员婚育时要进行遗传咨询,避免下一代出现耳聋。家系3中发现POLR1D一个新突变位点c.52A＞G,该突变可能与该家系非综合征型耳聋有关。