【摘 要】
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岩藻聚糖硫酸酯(Fucoidan)是一种富含岩藻糖和硫酸酯基的天然海洋来源杂多糖,具有多种生物活性。近年来,关于Fucoidan的构效关系研究,已经成为生命健康领域的研究热点。本文以温州市洞头区采集的羊栖菜(Sargassum fusiforme)为实验材料,对羊栖菜岩藻聚糖硫酸酯(S.fusiforme fucoidan,SFF)进行了系统的研究,包括岩藻聚糖硫酸酯的提取、分离纯化、结构表征、生
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岩藻聚糖硫酸酯(Fucoidan)是一种富含岩藻糖和硫酸酯基的天然海洋来源杂多糖,具有多种生物活性。近年来,关于Fucoidan的构效关系研究,已经成为生命健康领域的研究热点。本文以温州市洞头区采集的羊栖菜(Sargassum fusiforme)为实验材料,对羊栖菜岩藻聚糖硫酸酯(S.fusiforme fucoidan,SFF)进行了系统的研究,包括岩藻聚糖硫酸酯的提取、分离纯化、结构表征、生物活性评价等。主要结果如下:(1)干燥脱脂的羊栖菜粉末经酸水浸提、氯化钙分离,以及反复冻融和脱蛋白处理后获得总岩藻聚糖硫酸酯(c SFF)。再分别采用DEAE-纤维素柱层析法和Sepharose CL-6B凝胶过滤层析法纯化c SFF,最终获得8个均一级分SFF-11、SFF-12、SFF-2、SFF-31、SFF-32、SFF-41、SFF-42和SFF-5。(2)采用化学法(脱硫反应、酯化还原及甲基化分析)和光谱法(FT-IR、NMR手段)对SFF-32的一级结构进行表征,结果表明SFF-32是由Man、Fuc、Gal和Xyl等组成的多聚糖,主要为以下三种类型的连接方式:[→3)-α-L-fucp-(1→4)-β-D-Manp-(1→4)-β-D-Manp-(1→4)-α-L-Rhap-1→],[→3,4)-α-L-fucp-(1→4)-β-D-Manp-(1→3)-β-D-Glcp-(1→],[β-L-Xylp-(1→2,3)-β-D-Galp-(1→]。(3)上述8个均一级分的高级结构表征结果如下:扫描电镜结果表明各级分表面较光滑,外观存在一定的差异。级分SFF-11和SFF-12的外观形貌相似,都呈不规则片状或长条状,结构相对致密,推测其分子间斥力较小。SFF-2呈聚集状和不规则卷曲状结构,说明其具有一定的柔顺结构。SFF-3纯化后获得的两个级分SFF-31和SFF-32,表观结构则完全不同,SFF-31呈纤维状或片状,表面还带有孔洞的褶皱结构;而SFF-32则呈碎屑或雪花状堆积,表面形貌稀疏粗糙,高低不平。SFF-5呈现片状或短棒状,堆叠层次不一。SFF-32、SFF-41和SFF-42这些级分的分子间存在一定的排斥力,吸引力都较弱。刚果红实验和圆二色谱结果显示SFF-32,SFF-41存在三股螺旋结构,而SFF-11、SFF-2在水溶液中可能为无规则卷曲结构,SFF-12可能具有一定的柔顺性。(4)最后探究了各级分的体外DPPH自由基和羟自由基清除能力。结果显示各个级分都具有一定程度的抗氧化活性,其中具有高硫酸基含量和适中分子量的级分SFF-42表现最佳抗氧化活性,DPPH·清除率最高可达62.61%。因此推测羊栖菜岩藻聚糖硫酸酯的分子量大小和硫酸基团含量等因素可能影响其抗氧化活性。
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