随着化石燃料的日益匮乏和环境的严峻恶化,利用微生物将可再生资源转化为清洁能源越来越受重视,而其中燃料乙醇因其优越的性能,有望在未来替代石油作为能源,而纤维素乙醇产业的经济性是产业化的关键。本文研究构建能够分泌表达纤维素酶的产乙醇菌株,实现降解木质纤维素生产乙醇的整合生物加工过程。文中通过克隆来自运动发酵单胞菌Zymomonas mobilis ZM4的丙酮酸脱羧酶基因pdc和乙醇脱氢酶基因adhB,并通过Red重组将二者整合到大肠杆菌Escherichia coli JM109基因组中,首先构建了一株可以利用葡萄糖进行乙醇发酵的重组菌E. coli P81。随后将来源于多粘芽胞杆菌Bacillus polymyxa1.794的β-葡萄糖苷酶基因bglB在E.coli P81中进行了分泌表达,得到了一株可以进行纤维二糖降解和乙醇发酵双重功能的重组菌E.coli P81(pUC19-bglB)。该菌胞外分泌β-糖苷酶活达到84.78mU/mL菌液,纤维二糖酶活达到了32.32mU/mL菌液。该重组菌E.coli P81(pUC19-bglB)以纤维二糖为碳源进行乙醇发酵,乙醇得率达到了理论产率55.8%,而在葡萄糖和纤维二糖的共发酵中,其乙醇产量达到了理论产率46.5%。构建得到的此株CBP大肠杆菌能够利用p-葡萄糖苷酶生产乙醇,为构建能利用木质纤维素分解产物生产燃料乙醇的高效、稳定生产用工程菌奠定了良好的基础。