【摘 要】
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目的心肌梗死后心室重塑是心力衰竭的主要病因,死亡率极高。新近研究认为,持续的慢性炎症反应可能是心室重塑的主要机制之一。巨噬细胞参与了动脉粥样硬化的形成及进展、并在心肌梗死急性期发挥致炎作用,但其在缺血性心肌病中的作用尚不明确。本研究旨在探究具有抗炎作用的CD163阳性M2巨噬细胞在缺血性心肌病心室重塑中的作用。方法以ApoE-/-CD163-/-小鼠为研究对象,以WT及ApoE-/-为对照,给予1
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目的心肌梗死后心室重塑是心力衰竭的主要病因,死亡率极高。新近研究认为,持续的慢性炎症反应可能是心室重塑的主要机制之一。巨噬细胞参与了动脉粥样硬化的形成及进展、并在心肌梗死急性期发挥致炎作用,但其在缺血性心肌病中的作用尚不明确。本研究旨在探究具有抗炎作用的CD163阳性M2巨噬细胞在缺血性心肌病心室重塑中的作用。方法以ApoE-/-CD163-/-小鼠为研究对象,以WT及ApoE-/-为对照,给予16周高脂及普食喂养后,结扎左冠状动脉前降支,模拟在动脉粥样硬化基础上发生心肌梗死的过程,4周后确定形成缺血性心肌病（LVEF＜40%）模型后进行相关研究:①检测各组小鼠的血脂及动脉粥样硬化斑块面积:实验终点取血分离血浆,进行血脂检测;分离各组小鼠主动脉,进行油红“O”染色,并计算主动脉斑块面积;②各组小鼠心室结构和功能研究:心脏彩超检测左室舒张末期内径（LVDED）、左室收缩末期内径（LVSED）,左心室短轴收缩率（LVFS）、左室射血分数（LVEF）;qPCR检测心肌组织脑钠肽（BNP）水平;③心肌纤维化研究:在模型小鼠前降支穿针或结扎线下1cm处心肌组织制作石蜡包埋切片,进行Masson和天狼星红染色;q-PCR检测心肌组织Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原水平;④q-PCR检测心肌组织炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β表达水平。结果①与ApoE-/-对照组相比,ApoE-/-CD163-/-小鼠的TC、TG及LDL-C水平均显著增高（P均＜0.01）,主动脉油红O染色示主动脉斑块面积显著增加（P值＜0.01）;②心脏超声结果显示,普食组:与ApoE-/-对照组相比,ApoE-/-CD163-/-小鼠的LVDED（4.612± 0.06907 vs 5.484± 0.2635,P=0.0048）、LVSED（3.885± 0.1091 vs 4.877 ±0.3003,P=0.0078）、脑钠肽水平（P=0.0007）均显著增加,LVFS（15.46%和8.518%）、LVEF（32.72%和18.68%）均显著降低（均为P=0.000）。高脂组:与ApoE-/-对照组相比,ApoE-/-CD163-/-小鼠的 LVDED（3.928 ± 0.2623 vs 4.683±0.05991,P=0.0005）、LVSED（3.885 ± 0.1091 vs 4.877±0.3003,P=0.0116）、脑钠肽水平（P=0.034）均显著增加,LVFS（15.07%和 8.801%）、LVEF（32.37%和 19.97%）均显著降低（均为P=0.000）;③Masson染色及天狼星红染色结果显示,与ApoE对照组相比,以ApoE-/-CD1 63-/-为背景的缺血性心肌病模型,心脏可见大面积透壁性Masson和天狼星红染色阳性,且Ⅰ型及Ⅲ型胶原水平显著增加,纤维化程度明显加重;④qt-PCR结果显示,与ApoE-/-对照组相比,ApoE-/-CD163-/-组心肌组织的炎症因子TNF-α、IL-6及IL-1β表达水平均显著增加。结论①M2巨噬细胞膜蛋白CD163可能具有调节血脂代谢,抗动脉粥样硬化作用,首次提出CD163的抗动脉粥样硬化作用需在动脉粥样硬化的微环境背景下发挥作用;②M2巨噬细胞膜蛋白CD163可能具有抗心室重塑、抗心肌纤维化、增加LVEF、抗炎症作用。CD163的逆心室重构作用机制尚待研究,我们猜测可能与持续的慢性炎症反应有关,尚需进一步证实。
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