β-咔啉类衍生物HMD对BALB/c裸鼠人肝癌皮下移植瘤生长的影响

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目的:观察β-咔啉类衍生物(HMD)对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法:(1).BALB/c半裸(nu/+)雌性种鼠40只,全裸雄种鼠(nu/nu)30只为观察对象,根据繁殖卡的记录,进行统计以比较BALB/c裸鼠在IVC笼具和屏障环境中繁育能力。(2).观察HMD静脉注射对KM小鼠的急性毒性测定半数致死量(LD50)。测出静脉注射的LD100为25mg/kg,按1:0.8的组间距设7个组,采用Bliss法测定静脉注射LD50。(3).初步建立人肝癌细胞株裸鼠移植瘤模型并观察其生物学特性。通过培养人肝癌细胞系HepG2细胞并制备四种浓度(5×10~7、2×10~7、10~7、10~6个活细胞/ml)细胞悬液。40只裸鼠于腋下皮下注射HepG2细胞悬液0.2ml/只。观察各组裸鼠摄食、活动情况、成瘤时间、成瘤率、肿瘤生长情况。(4).研究HMD对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及其毒性,BALB/c雄性裸鼠每只以2×10~7(个活细胞/ml,0.2ml)建立人肝癌的裸鼠模型,随机分为组一:HMD低剂量组(0.22mg/kg);HMD中剂量组(0.44mg/kg);HMD高剂量组(0.87mg/kg);5-氟尿嘧啶注射液组(5-Fu)和生理盐水对照组。各组连续给药15天。观察HMD对裸鼠人肝癌移植瘤生长的影响及对裸鼠主要脏器的毒性。结果:(1).BALB/c裸鼠怀孕率为80%,BALB/c裸鼠在IVC笼具和屏障环境中繁育能力差异不显著(P>0.05)。IVC笼具中2♀(nu/+)与1♂(nu/nu)交配方式的纯合子仔鼠离乳率最高。(2).HMD静脉注射LD50为10.896mg/kg,95%可信限为9.5568~12.525mg/kg。(3).建立了人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,各组成瘤率为100%,瘤体出现时间在3~7天。(4).HMD低、中、高剂量组及阳性组对裸鼠人肝癌移植瘤体重的影响与阴性对照组比较均有极显著性差异(P<0.01)。HMD中、高剂量组及阳性组对裸鼠体重增加影响与阴性对照组比较有极显著性差异(P<0.01)。对肝脏重量及肝脏系数的影响,HMD低、中、高剂量组及阳性组与阴性对照组比较有显著性差异(P<0.05),肾脏及肾脏系数各组间差异不显著(P>0.05)。结论:(1).成功建立了人肝癌BALB/c裸鼠皮下移植瘤动物模型。(2).HMD对人肝癌HepG2裸鼠皮下移植瘤生长有明显的抑制作用,未见有异常毒性症状出现。
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