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目的 观察实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠疾病严重程度和Th17、Treg细胞失衡的相关性,观察黄芩茎叶总黄酮(Scutellaria baicalensis Stem-leaf Total Flavonoids,SSTF)对 EAE大鼠病程发生发展及对Th17、Treg细胞的影响,初步探讨黄芩茎叶总黄酮对多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)的治疗作用。方法构建EAE大鼠动物模型:豚鼠脊髓匀浆与完全弗氏佐剂(Complete Freund adjuvant,CFA)混在一起,于冰上反复抽打成油包水型乳剂作为免疫抗原。按0.5ml/只分别在大鼠四肢足垫和颈背部皮下注射免疫抗原,并在每只大鼠右后足背注射0.2ml的百日咳杆菌原液,诱导EAE模型。从免疫当天开始,每日定时记录大鼠的体质量,同时观察大鼠的临床表现情况与神经功能学评分。将50只Wistar雌性大鼠随机分为正常组(Normal)、模型组(EAE)、黄芩茎叶总黄酮高剂量组(SSTF-H)、黄芩茎叶总黄酮低剂量组(SSTF-L)和醋酸泼尼松组(Prednisone acetate)。其中,正常组和模型组自免疫当日起给予生理盐水1.5ml/只灌胃,1次/d,连续16d;SSTF高剂量组自免疫当日以剂量200mg/kg灌胃,1次/d,连续16d;SSTF低剂量组自免疫当日以剂量100mg/kg灌胃,1次/d,连续16d;醋酸泼尼松组自免疫当日以剂量6mg/kg灌胃,1次/d,连续16d。灌胃给药16天后,流式细胞术检测大鼠外周血Th17、Treg细胞分布频率;大鼠脊髓组织行HE染色和LFB染色;免疫组化法检测IL-17,TGF-β1和Foxp3蛋白的水平;ELISA法测定大鼠血清中IL-17、IL-23、TGF-β和IL-10水平;RT-PCR测脊髓组织中IL-17A mRNA,TGF-β1 mRNA 和 Foxp3 mRNA 的表达。结果 与模型组大鼠相比,药物治疗组大鼠的发病平均潜伏期相对增加(P<0.05);与正常组相比,模型组的体质量明显下降,SSTF和醋酸泼尼松能改善EAE大鼠体质量降低情况,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组大鼠相比,治疗组大鼠平均神经功能评分降低(P<0.05);与模型组大鼠相比,治疗组大鼠外周血中Th17细胞比例明显降低(P<0.05),而Treg细胞比例相对升高(P<0.05);HE染色结果显示,与模型组大鼠相比,治疗组的炎性细胞浸润减少,评分降低(P<0.05);LFB染色结果显示,与模型组大鼠比较,药物治疗组的病理学评分显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组大鼠比较,治疗组大鼠中IL-17蛋白的表达减少,而TGF-β1与Foxp3蛋白的表达增加,且差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组大鼠相比,药物治疗组的血清中IL-17和IL-23水平显著降低(P<0.05),而TGF-β和IL-10水平显著升高(P<0.05);RT-PCR检测结果显示,与模型组相比,药物治疗组的脊髓组织中IL-17AmRNA含量显著减低(P<0.05),而 TGF-β1mRNA 和 Foxp3mRNA 的表达显著增加(P<0.05)。结论 Th17/Treg细胞失衡与EAE大鼠疾病发生发展密切相关;黄芩茎叶总黄酮可以通过调节Th17/Treg细胞亚群平衡,从而在EAE大鼠的治疗中发挥一定保护作用。