根结线虫病生防链霉菌的筛选及其应用研究

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根结线虫(Meloidogyne spp.)作为农业生产上的一类重要病原物,其生物防治受到了人们的日益重视。本研究从采自全国各地的土样中分离得到对根结线虫病有防效的生防菌株JH108,然后优化其发酵培养基,并进行了离体的趋化性试验和防治番茄根结线虫病的温室试验。 从云南、海南、江苏、黑龙江和新疆等18省市29个地点采集的41个土样中分离得到303株链霉菌菌株,离体条件下测定了各菌株发酵滤液对南方根结线虫二龄幼虫(MI J2)的击倒活性,初步筛选出15个菌株,其发酵滤液稀释10倍后对MI J2校正击倒率仍达70%以上。将上述菌株的发酵滤液用于防治番茄根结线虫病,得到能显著抑制卵块形成的3个菌株:JH108、HJ102和SL105,2mL发酵滤液对卵块形成的抑制率分别达到75.2%、70.6%和73.2%,但是转接4代后只有JH108能稳定地产生具杀线虫活性物质的能力。根据培养性状,将菌株JH108归属为链霉菌的红色系列。 在根浸出液、发酵滤液及其混合液剂的处理下,MI J2在WA平板上靠近处理液的0~1.0 cm区间中分布率存在极显著差异(P<0.01),而加样时间(液剂与线虫同时放置或提前24 h处理)对其分布率没有显著影响。在番茄幼根附近注入发酵滤液后与作对照的没有注入发酵滤液的幼根对MI J2在该区间的分布差异显著(P<0.05),证明生防链霉菌JH108发酵滤液可以明显地降低线虫与番茄根的亲和力,并能强烈抑制线虫对番茄根的侵染。 采用单因素分析、L27(313)和L8(27)正交分析等设计方案筛选JH108的发酵培养基,利用SAS统计软件进行试验数据统计与方差分析,优化培养基各成分的含量。使用优化培养基[大豆粉20.0g,(NH42SO4 6.0g,蛋白胨3.0g,葡萄糖40.0g,酵母粉6.0g,NaCl 2.0g,K2HPO4 0.6g,CaCO3 2.0g,蒸馏水1000mL,pH 6.0]所得的发酵滤液稀释10倍后,处理MI J2,24h后校正死亡率达95.4%,比对照培养基的发酵滤液所产生的校正死亡率高6.9个百分点,差异达到极显著水平(P<0.01)。同时优化培养基的成本并没有增加。 在温室的灭菌条件下研究了生防菌JH108发酵滤液对番茄根结线虫病的防治效果。试验结果表明在不同剂量的发酵滤液处理时,以3mL/株的防效较好,与4mL/株的处理剂量不存在差异;苗床处理对移栽后的根结线虫病没有防治效果;总体上,对接卵的防效高于直接接虫,且在接虫/卵的同时灌根处理的防效最高(分别为78.3%
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