羊角膜上皮54.3kD蛋白质单克隆抗体的制备、鉴定及在免疫组化研究中的应用

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该文用SDS-PAGE电泳分析了羊角膜上皮与皮肤表皮水溶蛋白质成分,纯化了羊角膜上皮54.3kd特异性水溶性蛋白,测定其等电点为5.98.建立、鉴定了分泌抗54.3kd蛋白质单克隆抗体的杂交瘤细胞系,得到四株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞.四株单抗作用位点不同;对酸、碱、热均稳定;用免疫印染(Western-blotting)方法证明四株单抗均具有高度特异性.以单克隆抗体为免疫组织化学探讨,研究了54.3kd蛋白质的小鼠角膜胚胎发育期间的时空变化,并用双抗体夹心法测量了54.3kd蛋白质数量增减情况,结果表明:小鼠胚胎发育9-11天时,54.3kd蛋白质含量最高,集中分布于角膜上皮与晶体上皮,至14-15天时含量降低,已检测不出,随后54.3kd蛋白质逐渐出现,含量趋于平稳.推测54.3kd蛋白质为晶体诱导角膜形成时所激活的特异性蛋白质,并具有刺激细胞生长、分裂的作用.
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