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棉籽饼粕是广泛应用于畜牧生产的饲料原料,棉酚广泛存在于棉籽植物中,具有生殖毒性及其他毒性作用。为研究棉酚对雄性小鼠生殖毒性的机制,选用清洁级雄性昆明小鼠60只(体重为20.43±1.57 g),饲喂1周后随机分成4组:A(对照组)、B(40 mg/kg)、C(80mg/kg)、D(120 mg/kg),每组15只,自由饮水、采食。对照组灌胃1%羧甲基纤维素钠,试验组分别灌胃由1%羧甲基纤维素钠稀释的棉酚浓度为40、80、120 mg/kg的悬浊液,连续灌胃20 d。第21天颈椎脱臼处死小鼠,取睾丸组织用于检测。DCFH-DA探针标记法测定睾丸组织ROS的含量,QRT-PCR法检测小鼠睾丸组织中各基因mRNA的表达,Western blot法检测小鼠睾丸组织中各基因蛋白的表达。结果显示,与对照组相比,棉酚处理组睾丸组织中ROS含量增加且随着棉酚剂量的增加而增加,80、120 mg/kg组差异极显著(P<0.01,P<0.001)。40、80、120 mg/kg组JNK1 mRNA表达量显著升高(P<0.05),40、80、120 mg/kg组JNK2 mRNA表达量极显著升高(P<0.01),80、120 mg/kg组JNK3 mRNA表达量极显著升高(P<0.001),80、120 mg/kg组MKK4 mRNA表达量显著升高(P<0.05,P<0.001),80、120 mg/kg组FAS和FASL mRNA表达量极显著升高(P<0.01,P<0.001),120 mg/kg组C-MYC mRNA表达量极显著升高(P<0.001)。其中80mg/kg的棉酚能显著提高P-MKK4、P-JNK、FAS、FASL蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),120mg/kg的棉酚能极显著的提高P-MKK4、P-JNK、FAS、FASL和C-MYC蛋白的表达(P<0.01,P<0.001)。结论,灌胃80、120 mg/kg的棉酚能显著影响雄性昆明小鼠睾丸组织中ROS-JNK通路的活性。表明棉酚能够通过增加睾丸细胞中内源性ROS的含量,激活JNK信号通路,并促进凋亡系统FAS/FASL和原癌基因C-MYC的表达,诱导睾丸细胞的凋亡,进而对雄性小鼠的生殖系统造成损害,这可能是棉酚抗生育作用的主要机制之一。