【摘 要】
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为探索适合细胞生长的组织工程心脏瓣膜支架材料,该文以合成高分子聚己内酯为多孔支架的基体材料,再以天然高分子家蚕再生丝素蛋白和壳聚糖在冷冻干燥条件下修饰得到复合支架
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为探索适合细胞生长的组织工程心脏瓣膜支架材料,该文以合成高分子聚己内酯为多孔支架的基体材料,再以天然高分子家蚕再生丝素蛋白和壳聚糖在冷冻干燥条件下修饰得到复合支架,以期改善其生物相容性,并得到以下结论:1.聚己内酯支架的孔隙度取决于致孔剂的用量,而非尺寸.聚己内酯/丝素复合支架的形貌和再生丝素溶液的浓度有关,高浓度的丝素溶液易于在复合支架中形成海绵状结构;而以低浓度丝素溶液修饰的复合支架,其形貌没有明显改变.衰减全反射傅立叶红外分析表明复合支架表面的丝素在甲醇固定前有部分α构象,而固定后所形成的β构象保证了丝素能够在类似生理条件下稳定地黏附在复合支架上;此外,复合支架的亲水性也得到明显改善.2.进行了人胚肺成纤维细胞在聚己内酯/丝素复合支架上的体外培养实验.四唑盐比色法(MTT)定量分析结果表明复合支架更有利于细胞的生长增殖;电子显微镜的形貌分析表明,细胞在复合支架上可以很好地黏附、伸展分裂并形成连续的细胞层.实验结果证明,丝素蛋白的引入,对于改善聚己内酯材料的生物相容性是非常有效的.聚己内酯/丝素蛋白多孔复合支架可能在组织工程心脏瓣膜的研制中得到应用.此外,还用壳聚糖修饰了聚己内酯支架,并对形貌做了表征,期望复合支架的生物相容性也有所改进.此外,为揭示支架孔径大小对细胞生长行为的影响,以壳聚糖为基质材料,制作了一系列不同孔径尺寸的膜状支架,并在支架上进行了人胚肺成纤维细胞的培养,MTT分析结果表明:多孔支架比无孔支架具有更高的细胞种植效率;孔径越大的支架上增殖的细胞越多.因为在易溶胀的壳聚糖支架中,孔径越大,可供细胞生长的空间越大,则不易产生细胞接触抑制作用.电子显微镜形貌观察显示,细胞种植1天后,仅在无孔支架上伸展情况良好,多孔支架上仍保持球状;培养5天后,细胞在所有支架上的生长情况均良好.所以,致密的支架有利于细胞的伸展,而多孔支架有利于细胞增殖;在孔隙度相同的条件下,孔径越大增殖越多.
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