人参皂苷是人参主要的活性成分,具有提高记忆力,改善血液循环、抵抗杀死肿瘤细胞、提高免疫力等生理作用。稀有人参皂苷在人参中含量甚微,但药理作用强于常量组分,尤其在抗菌、消炎、抗肿瘤方面的作用日益受到关注。本文以常量人参皂苷Re为原料利用微生物转化制备稀有人参皂苷Rh₁。从辽宁鞍山和吉林抚松的人参种植土中分离纯化出若干种生物霉菌,经过初筛和复筛筛选出一株转化Re为稀有人参皂苷Rh₁的高效菌种。以转化效率较高的菌种为实验材料,转化率为衡量标准。对微生物转化的时间、温度、pH等条件分别进行了单因素实验。通过单因素实验寻找各因素最佳的反应条件,然后通过正交试验优化微生物转化条件。最终确定最佳微生物转化条件:在80mL的发酵液中蛋白胨为0.15 g,硫酸镁为0.06 g,硝酸钠0.30 g,磷酸氢二钾0.15 g,培养温度为34℃,pH 4.5,底物浓度0.6 g/L,培养时间5天,转化率可以达到23.14%。为了提高稀有人参皂苷Rh₁的转化率,本实验对前期高效菌种进行紫外诱变,并绘制致死曲线,确定了最佳的紫外照射时间2 min。通过紫外诱变得到若干株独立的菌落,并对它们进行发酵培养,最终发现其中四株转化效率有所提高,其中一株转化效率达到54.06%,是原始菌株的2.33倍。通过对该菌株进行ITS序列的测定最终确定该菌株和黑曲霉（KT852982.1）属于同一分支。将实验所得发酵液经饱和正丁醇溶液萃取后,蒸发浓缩。采用UItimate XB-C18（15mm×200mm,20-40μm）为制备柱,以AP0010高压输出泵提供恒定流速,乙腈:水=20:80为流动相,流速2.5m L/min的条件下,制得反应产物Rh₁纯度达到81.98%,产率71.83%。为了探究Re转化Rh₁的过程及各人参皂苷含量的检测,建立了同时测定人参皂苷Rg1,Re,Rf,Rg2和Rh₁等五种三醇类人参皂苷的定量分析方法。本实验以UG80-CAPCELL PAK NH2（4.6mm I.D.×250 mm,5μm）为固定相,乙腈:水=6:94（v/v）为流动相,紫外检测波长203nm,流速0.80 m L/min,25℃的条件下,样品得到较好的分离。