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金黄色葡萄球菌肠毒素B（SEB）是金黄色葡萄球菌分泌的一种细胞外毒素，主要存在于乳类等蛋白质含量较高的食物中，且具有较强的耐热能力，因此，建立一种快速，灵敏的检测方法显得尤为重要。本文以制备SEB特异性多克隆抗体为基础，结合免疫传感技术和材料自组装思路，构建阻抗型电化学免疫传感检测方法，主要研究内容如下：通过免疫新西兰大白兔获得SEB多克隆抗体，经纯化后抗体效价达1:80000。通过间接竞争ELISA法建立SEB竞争标准曲线，线性范围为1ng/mL～100ng/mL；半数抑制率IC50为13.97ng/mL，与SEA，SEC的交叉反应率均小于1.7%。通过L-半胱氨酸（L-cys）和纳米金自组装制备免疫传感检测方法，自制SEB抗体浓度为600μg/mL，恒温孵育1h，经BSA溶液封闭抗体未结合位点后，对SEB的阻抗响应线性范围为2ng/mL~100ng/mL，最低检测限为0.667ng/mL；传感器对于乳品平均加标回收率在87.3%~115.7%之间；对同一浓度的SEB重复测定6次，变异系数为2.35%；传感器在4℃中保存30天，稳定性良好，灵敏度较低。为了进一步提高检测灵敏度，论文通过原位聚合法制备得到聚苯胺纳米金复合膜结构（PANI/Au），并成功应用于免疫传感器的构建。结果表明，传感器的阻抗响应变化值与SEB浓度在0.1ng/mL~8ng/mL范围内呈现良好的线性关系，检测限大大降低，达0.033ng/mL（S/D=3）；乳品加标回收率在80.3%~112%之间。在此基础之上，采用离子液体保护的聚苯胺纳米金复合膜结构自组装免疫传感器有着更为良好的特异性，可再生能力及稳定性能。为了进一步完善免疫电极识别和捕获能力，利用本实验室自太湖水体中分离得到的生物磁小体，与自制的SEB多克隆抗体偶联制备得到免疫磁小体，强化了抗体捕获SEB的能力，成功制备了免疫磁小体强化的聚苯胺金免疫传感器。实验结果显示，传感器的最低检测限进一步降低，达到了0.017ng/mL（S/D=3）；对乳品平均加标回收率为81%~118%；稳定性及特异性良好，同时也为免疫磁小体在免疫传感器的应用过程中提供了一个新的设计思路。本实验所建立的自组装阻抗型电化学免疫传感检测方法，可应用于乳品中SEB的检测，具有良好的发展前景，为乳品中,SEB的检测工作提供了丰富详实的实验依据。