目的：以糖尿病耳聋模型为研究对象，观察脉通方对链脲佐菌素致糖尿病耳聋大鼠的防治作用及作用机制；采用蛋白质组学技术，观察脉通方干预后模型大鼠血清蛋白质组表达的变化，筛选差异表达蛋白并进行质谱鉴定和生物信息学分析，探讨脉通方防治糖尿病耳聋的分子机制。　　方法：　　1、复制模型：SPF级SD大鼠60只，实验前大鼠空腹血糖值<5mmol/L，听性脑干反应(ABR)测试正常者入选。入选大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素55mg/kg，1周后空腹血糖>16.7mmol/L者，表示糖尿病模型复制成功。　　2、动物分组与灌胃给药：造模成功的大鼠随机分为5组，即模型对照组、脉通方高、中、低剂量组、西药都可喜组，每组10只。另设正常对照组10只。各给药组分别按31.1g(生药)/kg、15.6g/kg、7.8g/kg灌胃(分别相当于成人用量10.8、5.4、2.7倍)，西药都可喜组按8mg/kg灌胃给药，每日1次，共10周；模型对照组和正常对照组灌胃等量生理盐水。　　3、测试方法与疗效指标观察：实验共进行12周。给药前及造模成功后5周、10周分别测试大鼠听性脑干反应(ABR)。同时分别尾静脉取血，罗氏血糖仪监测空腹血糖。给药第10周时，采用全功能自动血流变仪和血液粘度仪，严格按照使用说明书上的操作步骤，依次测定全血低切粘度、全血高切粘度、血浆粘度等血液流变学各项指标。给药后第10周，眼眶静脉取血，测定血清中甘油三脂（TC）、总胆固醇（TG）及高密度脂蛋白（HDL-C）水平及丙二醛(MDA)，过氧化脂质（LPO）含量及超氧化物岐化酶(SOD)活性。实验第12周结束,取耳蜗常规石腊包埋切片，HE染色，显微镜下观察耳蜗毛细胞、血管纹及螺旋神经节情况,并采用扫描电镜观察耳蜗病理形态变化。　　4、对大鼠模型血清蛋白质组表达的影响:实验第12周，各组大鼠颈动脉取血，对所获得的血清样品去除高丰度蛋白后，进行蛋白定量、等电聚焦(IEF)、胶条平衡、SDS-PAGE、染色脱色等步骤,获得血清蛋白2-DE凝胶图谱。应用Imagemaster图像分析软件，将正常对照组、模型对照组、都可喜组和观察组血清分别进行2-DE凝胶图谱匹配，将相对含量差异2倍的点选为差异表达蛋白质点。　　5、差异表达蛋白质的质谱鉴定:对上述实验所获得的差异表达蛋白质斑点进行胶内酶解，利用MADLI-TOFMS/MS质谱仪对差异表达蛋白进行鉴定，获得肽质量指纹图谱(PMF)，并在MASCORT数据库中搜索，确定差异表达蛋白质的身份。　　6、生物信息学分析：根据蛋白质在NCBI、uniprot、GO等数据库中已有的研究成果，鉴定差异表达蛋白生物学功能、亚细胞定位、所属的蛋白质家簇和蛋白质与疾病的关系等信息。根据蛋白质ID号，在专家数据库中查询其蛋白质注释，对已有的注释信息进行统计分析。通过蛋白质功能分类、亚细胞定位分类和生物过程分类，找到差异蛋白在这三个方面的主要不同之处。采用pathwaystudio软件和KEGG数据库，通过代谢通路分析，作出各蛋白质之间的相互作用关系图。　　结果：　　1、复制模型:实验成功复制了糖尿病耳聋模型，成模率接近70％。模型之间有很好的均一性，保证了后续实验的进行。　　2、对体重变化的影响：给药4周开始,脉通方高、中剂量大鼠体重增加明显，与模型组相比，有非常显著性差异（P<0.01）；给药6周后,都可喜和脉通方低剂量组体重开始明显增加，与模型组相比，有显著或非常显著性差异P<0.05~0.01）。给药6周后,中药高、中剂量组增加体重的效果优于都可喜，组间比较均有显著性差异（P<0.01）。　　3、对空腹血糖的影响：造模后1周，模型大鼠血糖明显升高，给药5周时血糖升高到较高水平。给药10周时,血糖水平有所下降,但与正常组相比，血糖仍显著升高(P<0.01)。说明模型制备成功,且血糖能维持较长时间。给药5~10周，脉通方高、中、低剂量组呈现一定降血糖作用，与模型组相比，有显著或非常显著性差异(P<0.05~0.01)；而都可喜组第5周时，无明显的降血糖作用，与模型组相比，无显著性差异（P>0.05），给药第10周时，高剂量组降血糖作用优于都可喜组，两组比较有显著性差异（P<0.05）。　　4、对血脂的影响：除都可喜降低甘油三脂（TC）作用不明显外，脉通方高、中、低剂量组均有不同程度降低甘油三脂（TC）、总胆固醇（TG），升高高密度脂蛋白（HDL-C）作用，与模型组相比，有显著或非常显著性差异（P<0.05~0.01）。　　5、对自由基的影响：脉通方高、中、低剂量组与都可喜组均可增强大鼠血清超氧化物岐化酶(SOD)活性，降低丙二醛(MDA)、过氧化脂质（LPO）含量，与模型组相比，有显著或非常显著性差异（P<0.05~0.01）。其中，脉通方高剂量组增强SOD活性，抑制LPO产生作用优于都可喜，两组比较均有显著性差异（P<0.05）。　　6、对血液流变学的影响：对于全血黏度值4个不同切变率而言，模型组均与空白对照组有显著性差异（P<0.001）。对于血浆粘度值切变率（200）而言，模型组、脉通方高、低剂量组与空白对照组均无显著性差异，脉通方中剂量组和都可喜组明显高于空白对照组（P<0.01）。对于红细胞压积而言，模型组、脉通方高剂量组与空白对照组差异有显著性意义（P<0.01），脉通方中、低剂量组和都可喜组与空白对照组的差异更有显著性意义（P<0.001），脉通方各剂量组和都可喜组与模型组差异均无显著性意义。对于全血高切还原粘度，模型组和各药物治疗组与空白对照组差异均无显著性意义。对于全血低切还原粘度而言，模型组与空白对照组差异有显著性意义（P<0.001），脉通方高剂量组疗效显著高于都可喜组（P<0.001），其全血低切还原黏度值明显低于模型组（P<0.001），但仍显著高于空白对照组（P<0.01），脉通方中剂量组的疗效较高剂量组有所下降，但其全血黏度值仍明显低于模型组（P<0.01），低剂量组疗效不显著，与都可喜和模型组无明显差异。对于红细胞刚性指数而言，模型组与空白对照组差异有显著性意义（P<0.001），脉通方高剂量组疗效显著，其红细胞刚性指数与空白对照组差异无显著性意义（P<0.01），明显低于模型组（P<0.001）和都可喜组（P<0.05），脉通方中剂量组的疗效较高剂量组有所下降，但其红细胞刚性指数仍明显低于模型组（P<0.01），脉通方低剂量组疗效不显著，与都可喜组和模型组无明显差异。对于红细胞聚集指数，模型组与空白对照组差异有显著性意义（P<0.001），脉通方高剂量组疗效显著，其红细胞聚集指数明显低于模型组（P<0.001）和都可喜组（P<0.01），但仍显著高于空白对照组（P<0.001），脉通方中、低剂量组和都可喜组疗效均不显著，与模型组无差异。对于全血高切相对黏度而言，模型组与空白对照组有显著性差异（P<0.001），脉通方高剂量组疗效显著，其全血高切相对粘度明显低于模型组和都可喜组（P<0.01），但仍高于空白对照组（P<0.05），脉通方中剂量组的疗效较高剂量组有所下降，但其全血高切相对黏度仍明显低于模型组（P<0.01），低剂量组与都可喜组疗效均不显著，与模型组无差异。对于全血低切相对黏度而言，模型组与空白对照组差异有显著性意义（P<0.001），脉通方高剂量组疗效显著，其全血低切相对粘度明显低于模型组和都可喜组（P<0.001），但仍显著高于空白对照组（P<0.001），脉通方中剂量组的疗效较高剂量组有所下降，但其全血低切相对黏度仍明显低于模型组（P<0.01），低剂量组疗效不显著，与都可喜组和模型组无明显差异。对于红细胞变形指数TK而言，模型组与空白对照组差异有显著性意义（P<0.05），各脉通方治疗组均有一定疗效，红细胞变形指数均低于模型组，但各治疗组间疗效差异不显著。　　7、对听性脑干反应（ABR）的影响：给药后5周糖尿病大鼠ABRⅠ（P<0.001）、Ⅴ（P<0.05）波潜伏期，Ⅰ~Ⅲ（P<0.001）、Ⅲ~Ⅴ（P<0.001）波间期和ABR阈值（P<0.001）较空白对照组均明显延长，Ⅲ波潜伏期和Ⅰ~Ⅴ波间期较空白对照组无明显变化；给药后10周，糖尿病大鼠ABRⅠ（P<0.001）、Ⅲ（P<0.001）、Ⅴ（P<0.001）波潜伏期较空白对照组延长更显著，Ⅰ~Ⅲ（P<0.01）、Ⅰ~Ⅴ（P<0.05）波间期和ABR阈值（P<0.001）较空白对照组均明显延长。给药后5周，脉通方高剂量组的Ⅲ~Ⅴ（P<0.01）波间期和ABR阈值（P<0.01）较模型组低，Ⅰ、Ⅴ波潜伏期和Ⅰ~Ⅲ波间期与模型组无显著性差异；脉通方中剂量组Ⅰ~Ⅲ（P<0.05）、Ⅲ~Ⅴ（P<0.05）波间期和ABR阈值（P<0.05）较模型组低，Ⅴ波潜伏期和Ⅰ~Ⅴ波间期与模型组无显著性差异；脉通方低剂量组除Ⅰ（P<0.001）、Ⅴ（P<0.05）波潜伏期明显高于模型组外，其它各波潜伏期和波间期与模型组差异不显著。高剂量组除Ⅰ波潜伏期（P<0.001）明显低于都可喜组外，其它各波潜伏期和波间期与都可喜组差异不显著；中剂量组Ⅰ（P<0.001）、Ⅴ（P<0.05）波潜伏期均显著高于都可喜组，其它各波潜伏期和波间期与都可喜组差异不显著；低剂量组Ⅰ（P<0.001）、Ⅴ（P<0.01）波潜伏期，Ⅲ~Ⅴ（P<0.05）波间期和ABR阈值（P<0.05）均明显高于都可喜组。给药后10周，脉通方高剂量组的Ⅲ波潜伏期（P<0.001），Ⅰ~Ⅲ（P<0.01）、Ⅲ~Ⅴ（P<0.01）、Ⅰ~Ⅴ（P<0.05）波间期均明显低于模型组，与空白对照组无显著差异；高剂量观察组的ABR阈值（P<0.001）显著低于模型组；中剂量观察组Ⅴ波潜伏期（P<0.01）、Ⅰ~Ⅲ波间期（P<0.05）和ABR阈值（P<0.001）均显著低于模型组，各波间期与空白对照组差异无显著性意义；脉通方低剂量组Ⅰ~Ⅲ波间期（P<0.05）和ABR阈值（P<0.001）均显著低于模型组；高剂量组Ⅰ（P<0.001）、Ⅲ（P<0.01）波潜伏期和Ⅲ~Ⅴ（P<0.05）波间期均明显低于都可喜组，其它各波潜伏期和波间期及ABR阈值与都可喜组差异均无显著性意义；脉通方中剂量组Ⅰ波潜伏期（P<0.01）明显低于都可喜组，其它各波潜伏期和波间期及ABR阈值与都可喜组差异均无显著性意义；脉通方低剂量组Ⅰ波潜伏期（P<0.001）虽明显低于都可喜组，但Ⅲ（P<0.001）、Ⅴ波（P<0.05）潜伏期均明显高于都可喜组，各波间期和ABR阈值与都可喜组之间差异无显著性意义。　　8、对耳蜗病理组织学改变的影响：光镜观察显示，模型组和各脉通方用药组三排外毛细胞排列整齐，未见毛细胞缺失。