【摘 要】
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目的:摸索从骨组织里提取蛋白的方法,并观察骨痂中蛋白质含量、种类与正常骨质相比的变化,寻找表达差异的蛋白质条带,为后续进行的骨折愈合过程的特征性蛋白质研究奠定基础。
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目的:摸索从骨组织里提取蛋白的方法,并观察骨痂中蛋白质含量、种类与正常骨质相比的变化,寻找表达差异的蛋白质条带,为后续进行的骨折愈合过程的特征性蛋白质研究奠定基础。方法:建立兔桡骨骨折模型,以对侧肢体相应部位健康骨组织为对照,分别提取骨折愈合过程中不同时间点(4w、6w、8w、12w)骨痂及对侧肢体相应部位骨组织的蛋白,用Bradford法检测各组蛋白提取液的浓度,并用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳获取蛋白质图谱,寻找差异蛋白条带并粗略估计分子量。结果:每一实验组与相应对照组比较蛋白质浓度均增高,实验4w组蛋白浓度比其他实验组高,P<0.05,而其他几组间相比无统计学差异,P>0.05。SDS-PAGE凝胶电泳图谱发现实验组蛋白条带比相应对照组多,主要集中在分子量为29.0-66.4kDa区间范围内,分子量约为30kDa附近有一明显条带在对照组中缺失。结论:骨折愈合过程中,骨痂的蛋白质含量、种类均比正常骨质增加,以修复活跃的骨折早期含量增加最为明显,分子量约为30kDa附近的明显差异条带,可选择作为后续研究中鉴定的对象。
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