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宫颈癌是女性第二位常见恶性肿瘤,早期就可经淋巴结转移,而近年来,宫颈癌发病呈现年轻化趋势,研究表明,VEGF-C在宫颈癌淋巴结转移中发挥了重要的作用。本研究拟采用免疫组化和基因转染及基因沉默技术,探讨该因子在宫颈癌侵袭转移中的分子机制,为将来临床基础研究和治疗奠定实验基础。 第一部分 VEGF-C、MMP9及TIMP-1在子宫颈癌组织中的表达及临床意义 目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF-C)基质金属蛋白酶MMP9及其抑制物TIMP-1在宫颈癌组织中的表达,及其与宫颈癌临床病理特征的关系。方法 采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接染色法(SP法),检测62例宫颈癌Ⅰ期、Ⅱ期患者癌组织中VEGF-C、MMP9及其抑制物TIMP-1的表达,并进行统计学分析。结果 VEGF-C、MMP9及其抑制物TIMP-1在宫颈鳞癌Ⅰ期、Ⅱ期均为高表达。VEGF-C在宫颈癌Ⅰ期、Ⅱ期和有淋巴转移者的表达率分别为73.8%、85%、100%。MMP9为66.7%、75%、93.3%。TIMP-1为64.3%、60%、66.7%,VEGF-C、MMP9及TIMP-1在浸润间质≥1/2的表达高于<1/2(P<0.05)者;其表达与浸润深度及淋巴结转移相关。结论 VEGF-C与宫颈癌的侵袭和转移密切相关;MMP9及其抑制物TIMP-1与肿瘤的浸润及侵袭转移有关,VEGF-C、MMP9及TIMP-1在宫颈癌转移中发挥了重要作用。 第二部分 VEGF-C基因转染在宫颈癌HeLa中的表达及其对侵袭和转移分子机制研究 目的 探讨脂质体介导VEGF-C基因转染人宫颈癌HeLa细胞及对其侵袭转移的分子机制研究。方法 用RT-PCR法构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/VEGF-C重组质粒,脂质体介导转染人宫颈癌HeLa细胞,并加压筛选获得转染成功的细胞株,经半定量RT-PCR检测转染后VEGF-C表达水平,ELISA检测培养上清中