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研究背景和目的非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）在发达国家及我国东部沿海地区正逐渐成为肝病的主要病因,普通成人的患病率在20%30%,其中已经发展为非酒精性脂肪性肝炎的患者占比10%20%,甚至有2%3%的患者已经发展到了非酒精性脂肪性肝炎相关肝硬化。目前NAFLD治疗的研究方向主要有增加有氧运动、限制能量的摄入、药物治疗、益生菌和益生元的干预。我们团队前期研究发现益生菌（DM9054+86066菌株）联合制剂灌胃干预脂肪肝模型大鼠,可通过改变肠道菌群的丰度及数量,调节胆汁酸代谢,降低大鼠血脂水平,从而改善肝脏脂肪变性,减轻肝脏炎症及肝脏细胞损伤。但是,胆固醇作为生成胆汁酸的上游原料,降脂益生菌联合制剂对其转运、合成的影响及其机制尚未研究。实验方法SPF级雄性LDLR-/-小鼠24只,适应性喂养3周后,随机分为3组（8只/组）,分别给予正常饮食+生理盐水灌胃、高脂饮食+生理盐水灌胃、高脂饮食+降脂益生菌灌胃(DM9054及86066各1×1010cfu)。每天上午9:00使用12#灌胃针给予各实验组小鼠灌胃处理。持续饲养干预15周,各组小鼠采用摘眼球取血,脱臼处死,留取血清、肝脏、结肠等组织标本。使用酶标仪法检测小鼠血清血脂水平;使用Western blot检验小鼠肝脏的CYP7A1、FXR、ABCG-8、SR-BI、HMGCR、ABCB-11、FGFR-4、SREBP-2的蛋白表达水平;使用Real Time PCR评估小鼠结肠组织的FXR、ASBT、FGF-15、ABCG-5的mRNA表达水平。实验结果1.小鼠体重变化:与普通饲料喂养的对照组相比,高脂饲料喂养的模型组小鼠体重增加,差异有统计学意义（P<0.05）;与模型组相比,干预组小鼠体重减轻,差异均统计学意义（P<0.05）。2.小鼠血脂变化:与对照组相比,模型组小鼠血清HDL水平降低,TC、TG、LDL水平升高（P<0.05）;降脂益生菌干预后,小鼠血清HDL水平升高,TC、TG、LDL水平降低（P<0.05）。3.小鼠肝脏的病理改变:对照组小鼠肝脏大体标本表面光滑,颜色鲜红,肝缘锐利,HE染色镜下可见组织结构正常,细胞轻微水肿,苏丹Ⅲ染色未见明显异常;模型组小鼠的肝脏大体标本表面油腻,布满黄色斑点,黄红相间,肝缘变钝,HE染色镜下可见组织结构异常,大量肝细胞脂肪变性,点状坏死,汇管区炎症细胞浸润,苏丹Ⅲ染色可见大量橘黄色脂滴;干预组小鼠的肝脏大体标本表面光滑,颜色鲜红,有少许黄色斑点,肝缘锐利,HE染色镜下可见细胞水肿,组织结构正常,胞浆内可见少许脂滴,苏丹Ⅲ染色可见散在较小的脂滴。4.小鼠肝脏标本检测蛋白表达水平:与对照组相比,模型组小鼠肝脏FXR、ABCG-8、SR-BI、ABCB-11、FGFR-4蛋白表达水平降低（P<0.05）,SREBP-2蛋白表达明显升高（P<0.05）。与模型组相比,干预组小鼠肝脏SREBP-2与HMGCR蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,FGFR-4蛋白表达水平升高（P<0.05）。5.小鼠肠道标本检测mRNA表达水平:与普通饲料喂养的对照组相比,高脂饲料喂养的模型组小鼠肠道标本中ABCG-5与FGF-15 m RNA表达水平明显降低,差异具有统计学意义（P<0.05）,ASBT mRNA表达水平明显升高且差异具有统计学意义（P<0.05）;与模型组相比,给予降脂益生菌联合制剂灌胃干预的干预组小鼠肠道标本中ABCG-5和ASBTmRNA表达水平明显降低（P<0.05）,FGF-15 mRNA表达水平明显升高（P<0.05）。研究结论1.长期高脂饮食诱导LDLR-/-小鼠,可成功建立NAFLD小鼠模型,而降脂益生菌干预可改善小鼠的NAFLD;2.长期高脂饮食可促进胆固醇的吸收,抑制胆固醇的分泌,降脂益生菌干预可进一步促进胆固醇的吸收,对胆固醇分泌无明显影响;3.降脂益生菌干预通过下调SREBP2的表达,抑制HMGCR,减少胆固醇的合成;4.降脂益生菌干预可以通过激活FXR-FGF15途径,改善胆汁酸代谢。