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目的:动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是心血管系统中最常见的慢性疾病,威胁着我国人民的健康[1],在发达国家其发病率和死亡率也很高[2]。AS是一种慢性炎性疾病,低密度脂蛋白(Low density lipoprotein,LDL)在内皮下积累被氧化成ox-LDL。它引起炎症反应,然后被巨噬细胞吞噬后,发育成泡沫细胞而参与了AS的病理过程。因此LDL的氧化在慢性炎症反应中起着极其重要的作用[3,4,5]。因LDL导致的肾素-血管紧张素系统(Renin-angiotensin system,RAS)在CVD的发病机制起着非常重要的作用。阻断RAS途径可减少AS斑块进展和缺血事件。本实验旨在探究Raw264.7细胞中RAS在LDL主动氧化中的作用,为了解LDL的主动氧化提供一定的依据,为AS的临床治疗提供新的思路。方法:1.LDL刺激Raw264.7细胞:ACE活性检测试剂盒检测细胞ACE的活性;AngⅡ含量测定试剂盒检测AngⅡ的含量;Real-Time PCR检测ACE的m RNA水平;AT2的表达用Real-Time PCR及Western Blot检测。2.AngⅡ、AngⅣ分别刺激Raw264.7细胞:Western Blot检测FABP5的表达。3.ACE抑制剂(卡托普利)刺激Raw264.7细胞:分为三个实验组——LDL组、LDL+卡托普利组、卡托普利组,用PLA2活性测定试剂盒测定细胞内PLA2的活性;Western Blot检测FABP5的表达;探究Raw264.7巨噬细胞中RAS是否参与了氧化LDL的过程。4.分别用LDL、LDL+卡托普利、卡托普利、AngⅡ、AngⅣ处理Raw264.7细胞24h,然后收集细胞培养上清及细胞沉淀,测定其中所含的MDA的量,进而判断各个处理方式的Raw264.7细胞的脂质过氧化程度。结果:1.LDL处理Raw264.7细胞后,ACE的活性升高,AngⅡ的含量升高,ACE m RNA水平、AT2 m RNA和蛋白质的表达都升高(P<0.05)。2.AngⅡ、AngⅣ刺激Raw264.7细胞后,FABP5表达都升高(P<0.05)。3.LDL刺激组中,和对照组相比,PLA2的活性在12min升高(P<0.05),FABP5在3h、5h表达升高(P<0.05);LDL+卡托普利刺激组中,和LDL组相比,PLA2的活性在12min降低(P<0.05);和对照组相比,FABP5在5h时的表达明显降低(P<0.05);卡托普利刺激组中,和对照组相比,PLA2的活性及FABP5的表达均无变化。4.在细胞中,与对照组相比,LDL、AngⅡ、AngⅣ处理Raw264.7细胞24h后,MDA含量升高(P<0.05),LDL+卡托普利、卡托普利处理细胞24h后,MDA含量无明显变化;而与LDL组相比,LDL+卡托普利处理后,MDA含量降低(P<0.05)。在细胞培养上清中,与对照组相比,LDL、LDL+卡托普利、AngⅡ、AngⅣ处理Raw264.7细胞24h后,MDA含量均升高(P<0.05),卡托普利处理后MDA含量无变化;与LDL组相比,LDL+卡托普利处理后,使MDA含量有所降低(P<0.05)。结论:LDL能激活部分RAS,RAS能使Raw264.7细胞中FABP5的表达水平上调,并且LDL氧化过程中FABP5表达的升高是通过RAS实现的。我们猜测下游可能是通过与PPARs和RXRα形成的异二聚体结合,进而与目的基因上的PPRE结合,从而导致LDL的氧化。