【摘 要】
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背景及目的:肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,对人类的生命安全造成了极大的威胁。肺癌包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌,而其中非小细胞肺癌占据了肺癌的80%-85%,所以寻找新型的非
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背景及目的:肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,对人类的生命安全造成了极大的威胁。肺癌包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌,而其中非小细胞肺癌占据了肺癌的80%-85%,所以寻找新型的非小细胞肺癌靶点刻不容缓。转录因子GRHL2是GRHL基因家族中的成员之一,现已知与各类生物学过程有关,例如:损伤修复,上皮的完整性和上皮间质转换等;然而,GRHL2在肿瘤中的具体机制还不清楚,并且在不同的肿瘤中发挥不同的作用,甚至作用相反。方法:在肺癌组织及癌旁组织标本中、正常人支气管上皮细胞及肺癌细胞系运用Western Blotting、real-time PCR、IHC技术,分析其中GRHL2的蛋白及mRNA表达水平;通过转染GRHL2治理构建过表达及干扰稳定细胞株,运用Western Blotting技术验证其表达水平;采用细胞生长、克隆集落形成Transwell、Wound Healing实验,检测GRHL2过表达和干扰后,细胞生长、转移能力是否发生变化;生物信息学分析,检测其可能调控的靶向基因位点,运用Western Blotting验证靶点基因及通路相关基因的蛋白表达水平是否随GRHL2过表达和干扰而发生变化;使用双荧光素酶报告实验检测GRHL2对RhoG的调控作用。结果:在肺癌细胞和组织中,GRHL2的表达水平显著高于正常人支气管上皮细胞和癌旁组织;细胞生长实验和克隆集落形成实验显示敲低GRHL2可以抑制肺癌细胞的生长;Transwell、Wound Healing实验显示敲低GRHL2具有促进肺癌细胞侵袭和转移的能力;GRHL2可能通过靶向结合下游基因RhoG从而抑制非小细胞肺癌细胞的转移。结论:GRHL2在非小细胞肺癌及组织中高表达,并通过调节RhoG的转录活性而抑制肿瘤细胞的转移。
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