刺芒柄花素雌激素样作用及对大鼠主动脉弓雌激素受体表达的影响

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目的:探讨红车轴草主要成分刺芒柄花素的雌激素样作用及其对去卵巢+高脂血症大鼠主动脉弓雌激素受体表达的选择性调控作用。方法:健康成年雌性SD大鼠50只随机分为假手术组、模型组、尼尔雌醇阳性对照组、刺芒柄花素低剂量组和高剂量组五组,每组10只。受试鼠均用3%戊巴比妥钠腹腔麻醉,假手术组受试鼠仅手术切除卵巢周围小块脂肪,其余4组受试鼠手术切除双侧卵巢,术后第5~10天,每天1次连续进行阴道冲洗脱落细胞涂片检测,确证假手术组有正常动情周期变化,而后4组固定于动情间期,即造模成功。第11天起,假手术组给予普通饲料喂养,其余各组饲以高脂饮食;同时,假手术组及模型组1ml.100g-1.d-1生理盐水灌胃,其余组分别使用尼尔雌醇2.5mg.kg-1.w-1.和刺芒柄花素20mg.kg-1.d-1、100mg.kg-1.d-1灌胃,连续8周。第8周末,实验鼠称重后颈椎脱臼处死,切取主动脉弓并置-80℃冰箱保存备用,采用western blot和real-time PCR检测ERα和ERβ含量;摘取子宫,称重后进行固定、染色、镜检。结果:1.假手术组受试鼠阴道脱落细胞呈现正常的动情周期变化,子宫指数1.3547±0.2014;模型组受试鼠阴道脱落细胞持续呈现为大量多核白细胞,子宫指数严重降低(0.2609±0.0472),内膜严重萎缩;尼尔雌醇组受试鼠阴道脱落细胞持续为大量角化上皮细胞,子宫指数1.097±0.2461,内膜上皮显著增生;高剂量刺芒柄花素组受试鼠阴道脱落细胞持续有角化上皮细胞,子宫指数0.7107±0.0521与模型组比较有显著性差异(P<0.05),内膜形态接近于假手术组;低剂量组受试鼠阴道脱落细胞为大量多核白细胞,子宫指数0.3962±0.0424,与模型组比较无显著性差异(P>0.05),内膜萎缩。2.蛋白质水平上,模型组大鼠主动脉弓ERβ的含量较假手术组明显减少(0.5531±0.0457Vs0.8188±0.0719,P<0.05),尼尔雌醇组和高剂量刺芒柄花素组较模型组有所升高(0.8883±0.0904、7264±0.0659,P<0.05),低剂量刺芒柄花素组(0.5760±0.0369)较模型组也升高,但二者差别无统计学意义(P>0.05)。3.基因水平上,模型组ERαmRNA和ERβmRNA的含量分别为假手术组的37.6%-48%和43%-55%;ERαmRNA的表达中,尼尔雌醇组为模型组的204%-262%,高、低剂量的刺芒柄花素组ERαmRNA的表达量分别为模型组的90%-115和96%-121%;ERβmRNA的表达中,尼尔雌醇组与高剂量刺芒柄花素组分别为模型组的196%-244%、151%-184%,但低剂量组为模型组93%-119%。结论:刺芒柄花素对性器官有弱雌激素样作用,能选择性上调去势大鼠主动脉血管ERβ的表达。
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