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与传统化疗药物相比,基因疗法可以更精准的杀死肿瘤细胞,减轻了对正常细胞和组织的伤害。而单纯的基因药物很难精准进入肿瘤细胞,容易受到核酸酶的快速裂解和肾/肝的清除。因此需要先进的药物运输载体来促进它们的输送。由于EPR效应,纳米颗粒已广泛用于肿瘤治疗。针对肿瘤特定的结构和理化性质设计的刺激性响应纳米颗粒系统受到了越来越多研究者的关注,酯酶是在肿瘤细胞中过表达的酶之一。基于以上内容,我们设计了一种核酸药物载体(pDPD),以阳离子聚合物聚甲基丙烯酸二乙氨基乙酯(pDEAEMA)为主体,负载地塞米松(DEX)作为疏水层,接载PEG作为亲水层,最终制备成两亲性胶束。阳离子聚合物pDPD可以通过静电作用接载核酸药物TRAIL,形成pDPD/TRAIL结合物。我们对pDPD/TRAIL结合物的生物安全性及抗肿瘤性能也进行了评估。主要工作如下:(1)基因药物载体合成:以甲基丙烯酸二乙氨基乙酯为底物,本体聚合后用4-甲氧基氯苄使其季铵化,通过无水氯化铝催化溶液脱去甲基,用DCC反应负载地塞米松,最后接载PEG包裹在外层。通过红外、核磁验证其结构变化,最后合成了粒径35-60nm,分子量18500左右的载体胶束,有利于药物的EPR效应。解决了纯核酸药物难以到达肿瘤细胞的问题,同时pDPD载体对肿瘤部位高浓度酯酶具有靶向能力。DEX能够减轻肿瘤治疗过程中带来的炎症反应,提供与核酸药物协同治疗的效果。而PEG层则可以增强其体内长循环性能及载体的亲水性。(2)用琼脂糖凝胶电泳测试pDPD结合TRAIL基因的紧密程度,以及在酯酶环境下的响应能力。在pDPD/TRAIL氮磷比5:1及以上时,pDPD便可以较紧密地结合TRAIL核酸药物。针对以往阳离子聚合物载体到达肿瘤部位后难以释放药物的缺陷,pDPD/TRAIL具有电荷反转能力,在进入肿瘤细胞后酯酶会水解酯键,电势由正转负,释放出TRAIL核酸药物。(3)测试了细胞毒性试验和抗肿瘤性能,pDPD/TRAIL结合物能够对宫颈癌细胞造成较大杀伤,浓度500 ug/mL时,HeLa细胞存活率为22.89%,而对正常细胞L929并没有表现出明显的细胞毒性。同时抗肿瘤性能测试也证明了pDPD/TRAIL结合物具有良好的抗肿瘤性能且不会对小鼠机体造成明显伤害,具有良好的生物安全性。