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目的探索葛根芩连汤对结直肠癌患者肠道菌群、肠黏膜屏障功能的影响。方法本研究采用随机对照的前瞻性研究设计,共纳入河北医科大学第四医院自2018年7月1日至2019年12月31日确诊结肠癌或直肠癌且符合手术指征、可手术的患者,共70例。本研究经河北医科大学第四医院伦理委员会批准,所有纳入研究的患者均取得知情同意。将符合纳入标准的患者随机分入对照组(n=37)和用药组(n=33)。对照组患者入院后给予常规准备后手术;用药组患者入院后,在常规准备的基础上,给予葛根芩连汤连续口服7天后手术。对照组患者在入院时留取外周血;用药组患者在服用葛根芩连汤前后分别收集外周血和粪便。采用流式细胞术检测两组患者外周血中免疫细胞T、NK、NKT和Treg细胞的比例;采用ELISA法检测两组患者血清中细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-6、IL-10及肠神经递质5-HT的水平;采用免疫组织化学方法分别测定两组患者肿瘤组织和癌旁正常肠组织中ZO-1、occludin、NF-κB、TNF-α的表达水平;采用16S r DNA测序技术检测用药组患者服用葛根芩连汤前后肠道菌群的变化情况。结果1.用药组患者入院时有14人表现为腹泻、排便次数增多。服用葛根芩连汤后,这14人中有12人(86%)诉腹部症状较服药前好转,具体表现为腹泻减轻、排便次数减少,由4-6次/日减少为2-3次/日。无相关不良事件发生。2.用药组患者服用葛根芩连汤后,外周血中CD3+CD4+T细胞占淋巴细胞的比例较用药前和对照组均明显升高(P<0.05);该组患者服用葛根芩连汤后外周血中NKT细胞占淋巴细胞的比例较用药前和对照组也明显升高(P<0.05)。而服用葛根芩连汤后与用药前、对照组相比,CD3+CD8+T细胞、NK细胞及Treg占淋巴细胞的比例无明显变化(P>0.05)。3.与用药前和对照组相比,用药组结直肠癌患者服用葛根芩连汤后血清中细胞因子TNF-α水平明显降低(P<0.05);血清中细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-6和IL-10的水平无明显变化(P>0.05)。用药后血清中的5-HT水平较用药前明显降低(P<0.05),较对照组也有所降低,但无统计学意义(P>0.05)。4.用药组结直肠癌患者肿瘤组织中ZO-1、occludin的表达水平明显高于对照组(P<0.05)。用药组患者癌旁正常肠组织中ZO-1的表达水平也明显高于对照组(P=0.010);但occludin在对照组和用药组患者的癌旁正常肠组织中的表达水平无明显变化(P>0.05)。与对照组相比,用药组患者肿瘤组织中NF-κB、TNF-α的表达水平明显降低(P<0.05);而对照组与用药组相比,癌旁正常肠组织中NF-κB、TNF-α的表达水平无明显变化(P>0.05)。5.用药组患者服用葛根芩连汤后与用药前相比,肠道菌群的α和β多样性有所降低。用药组患者,服葛根芩连汤后拟杆菌属(Bacteroides)、阿克曼菌属(Akkermansia)和普雷沃菌属(Prevotella)的丰度增加,而巨单胞菌属(Megomonas)和韦荣球菌属(Veillonella)丰度有所减少。KEGG富集分析显示,服用葛根芩连汤前后,患者肠道菌群差异基因的功能主要富集在能量代谢(energy metabolism)、免疫系统疾病(immune system disease)、免疫系统(immune system)、神经系统(nervous system)和癌症(cancers),且有统计学意义(P<0.05)。结论葛根芩连汤能够改善结直肠癌患者的肠黏膜屏障功能,进而减轻全身炎症反应、增强机体的免疫功能;而这些功能可能是通过调控肠道菌群实现的。图[27]幅;表[4]个;参[72]篇。