壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠肝星状细胞AKT/P53/Bcl-2信号通路的影响

来源 :广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhanghuajngs
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目的:本研究以探讨壮肝逐瘀煎能从 AKT/ P53/Bcl-2信号传导通路调控HSC凋亡为着手点,以进一步阐释壮肝逐瘀煎抗肝纤维化的作用机理。  方法: SD大鼠102只,雌雄各半,体重220~250克,随机取14只作为正常对照组(A组),其余采用四氯化碳(CCl4)复合因素造肝纤维化的动物模型,造模成功后,随机分为病理模型组(B)、壮肝逐瘀煎大、中、小剂量组(C、D、E)和大黄蟅虫丸组(F)及秋水仙碱对照组(G组)。C、D、E、F、G组分别予大、中、小剂量壮肝逐瘀煎和大黄蟅虫丸及秋水仙碱灌胃,其它二组予同等容积的生理盐水灌胃。观察肝组织病理形态变化。采用免疫组织化学染色图像分析方法,观察大鼠肝组织AKT、P53、Bcl-2蛋白的表达;采用real-time PCR方法,检测肝组织AKT、P53、Bcl-2基因的表达。  结果:大鼠一般情况:壮肝逐瘀煎可明显改善HF大鼠的精神状态、饮食、皮毛色泽,并增加其体重。肝组织形态学变化:壮肝逐瘀煎各组治疗后肝脏表面形态结构改善较为明显,高、中剂量组改善尤为明显。壮肝逐瘀煎对AKT、P53、Bcl-2蛋白的表达的影响:与正常对照组相比,病理模型组AKT和Bcl-2明显增加(P<0.01),P53降低(P<0.05)。壮肝逐瘀煎能够抑制AKT和Bcl-2的表达,增强P53的表达壮肝逐瘀煎大剂量组明显优于壮肝逐瘀煎小剂量组、大黄蟅虫丸组和秋水仙碱组(P<0.01);壮肝逐瘀煎大剂量组优于壮肝逐瘀煎中剂量组(P<0.05)。壮肝逐瘀煎中剂量组优于壮肝逐瘀煎小剂量组、大黄蟅虫丸组和秋水仙碱组(P<0.05);壮肝逐瘀煎小剂量组、秋水仙碱组与大黄蟅虫丸组效果相当(P>0.05),无统计学意义。结果表明壮肝逐瘀煎大剂量组治疗效果最好,壮肝逐瘀煎中剂量组次之,壮肝逐瘀煎小剂量组、秋水仙碱组与大黄蟅虫丸组效果相同。壮肝逐瘀煎对AKTmRNA、P53mRNA、Bcl-2mRNA表达的影响:壮肝逐瘀煎能够抑制AKTmRNA、Bcl-2mRNA的表达,增强P53mRNA的表达。壮肝逐瘀煎大剂量组明显优于壮肝逐瘀煎小剂量组、大黄蟅虫丸组和秋水仙碱组(P<0.01);壮肝逐瘀煎大剂量组优于壮肝逐瘀煎中剂量组(P<0.05)。壮肝逐瘀煎中剂量组优于壮肝逐瘀煎小剂量组、大黄蟅虫丸组和秋水仙碱组(P<0.05);壮肝逐瘀煎小剂量组、秋水仙碱组与大黄蟅虫丸组效果相当(P>0.05),无统计学意义。结果表明壮肝逐瘀煎大剂量组治疗效果最好,壮肝逐瘀煎中剂量组次之,壮肝逐瘀煎小剂量组、秋水仙碱组与大黄蟅虫丸组效果相同。  结论:壮肝逐瘀煎对肝星状细胞AKT/P53/Bcl-2信号通路具有调控作用,其抗肝纤维化作用机制可能与抑制肝脏星状细胞的活化和增殖有关。
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