目的:建立人骨肉瘤MG63荷瘤裸鼠模型和金黄色葡萄球菌炎症反应小鼠模型；应用⁹⁹Tc^m标记血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF_125-136多肽片段，观察其在人骨肉瘤MG63荷瘤裸鼠模型和炎症反应小鼠模型的体内分布及SPECT显像特征，对比分析⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃在肿瘤与炎症反应两种模型中的差别，探讨⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃早期诊断肿瘤的可行性及特异性。方法:1建立动物模型1.1人骨肉瘤MG63荷瘤裸鼠模型人骨肉瘤细胞MG63用含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基在37℃，CO2体积分数5%的培养箱中常规培养传代。取对数生长期的MG63细胞,胰蛋白酶消化后用DMEM高糖培养基制成细胞悬液,对细胞计数并将细胞浓度调整为5×107/ml，无菌条件下0.2ml/只注射于BALB/c裸鼠的左前肢根部背侧皮下。1.2金黄色葡萄球菌炎症反应小鼠模型选取雌性、质量20～25g的昆明小鼠，取生长良好的金黄色葡萄球菌菌落，用灭菌蒸馏水配制成0.5个麦氏单位浓度（1×10⁸cfu/ml）的菌液，按0.2ml/只注射于每只昆明小鼠的左前肢背侧肌肉。2⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃在动物模型的体内分布实验2.1⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃在人骨肉瘤MG63荷瘤裸鼠的体内分布实验选取20只瘤体形态规整，直径为0.8-1cm的人骨肉瘤MG63荷瘤裸鼠，按随机数字法将其分为4组，每组5只。每只裸鼠经尾静脉注入0.2ml约18.5MBq（0.5mCi）9Tcm-VEGF125-136-MAG3，分别于注射后0.5h、1h、2h、4h各处死一组荷瘤裸鼠，心脏取血后，取心、肝、脾、肾、小肠、骨骼、肌肉、肿瘤组织，生理盐水冲洗，滤纸吸干水分，电子天平准确测量各器官组织质量，γ计数器计数各器官组织的放射性计数，同时测定相同时刻的标准源的放射性计数。计算各时间点每克组织的百分注射剂量率（percentage activity of injection dose per gram of tissue，%ID/g）。同步测定不同时间点的肿瘤组织（T）与对侧肌肉组织（M）的放射性计数比值，即肿瘤组织/肌肉组织（target-to-muscle ratios，T/M）比值。2.2⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃在金黄色葡萄球菌炎症反应小鼠的体内分布实验选取20只生长状态良好，注射部位出现红、肿、活动障碍的金黄色葡萄球菌炎症反应昆明小鼠，按随机数字法将其分为4组，每组5只。用上述方法（荷瘤裸鼠模型体内分布实验）对炎症反应组小鼠进行体内分布实验，并计算各时间点每克组织的百分注射剂量率（percentage activityof injection dose per gram of tissue，%ID/g）。以炎症反应组织作为靶组织（T），同步测定不同时间点的炎症组织（T）与对侧肌肉组织（M）的放射性计数比值，即炎症组织/对侧肌肉组织T/M比值。3⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃在动物模型的SPECT显像实验3.1另取5只人骨肉瘤MG63荷瘤裸鼠，每只裸鼠经尾静脉注射0.2ml约18.5MBq （0.5mCi）的⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃，分别于注射后0.5h、1h、2h、4h行SPECT静态显像。利用感兴趣区技术（region of interest，ROI）以肿瘤组织对侧肌肉作为非靶组织，计算不同时间点肿瘤组织与对侧肌肉的放射性计数的比值（T/NT）。3.2同样的方法对炎性反应组（5只）昆明小鼠进行SPECT静态显像，并计算不同时间点的T/NT比值。结果:1动物模型的观察与鉴定1.1人骨肉瘤MG63荷瘤裸鼠模型肿瘤细胞接种后，裸鼠于实验动物中心SPF级（specific pathogenfree，无特定病原体）环境下饲养。大约1-2周成瘤，3-4周肉眼观察肿瘤长至直径约0.8-1cm。取少许肿瘤组织进行组织病理学检验，证实为骨肉瘤组织。1.2金黄色葡萄球菌炎症反应模型注射48h后，菌液注射部位的肌肉出现红、肿、活动障碍。取少许注射部位肌肉组织进行组织病理学检验，证实为炎症反应组织。2⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃在动物模型的体内分布实验⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃在人骨肉瘤MG63荷瘤裸鼠模型的肾脏中放射性分布最高，其次是小肠和肝脏，提示标记物主要经肾脏排泄，其次为消化道。其它组织中放射性分布较少。肿瘤组织在各时间点均有较高的放射性摄取，1h时摄取最高。在炎性反应小鼠体内肾脏放射性分布最高；其次是小肠和肝脏；其它组织中放射性分布较少。炎症反应组织各时间点均无明显的放射性摄取。对人骨肉瘤MG63荷瘤裸鼠组与炎性反应组各时间点T/M值比较显示：肿瘤组各时间点T/M值均高于炎性反应组，其中注射后1h肿瘤组与炎性反应组T/M比值分别为3.04±0.07和1.26±0.37，差异有统计学意义（t=10.70，P＜0.05）。3⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃在动物模型的SPECT显像实验人骨肉瘤MG63荷瘤裸鼠组，⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃在肿瘤部位可见放射性聚集，0.5h、1h、2h、4h各组中于1h时肿瘤显像最清晰。注射⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃0.5h后肾、肝脏及肠道等组织可见明显显影，随时间延长，肾、肝脏及肠道等组织显影逐渐变淡。脑、甲状腺及肌肉未见明显显影。炎性反应小鼠组，炎症反应部位各时间点显影均较淡，无明显的⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃摄取。注射后0.5h腹腔显影明显，随时间延长显影逐渐变淡，脑、甲状腺及肌肉等组织未见明显放射性摄取。利用ROI法测得人骨肉瘤MG63荷瘤裸鼠组与炎性反应组各时间点T/NT值显示：肿瘤组各时间点T/NT值均高于炎性反应组，其中注射后1h肿瘤组与炎性反应组T/NT比值分别为3.10±0.19和1.34±0.55，差异有统计学意义（t=6.73，P＜0.05）。结论:⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃可被荷瘤裸鼠高表达VEGFR的肿瘤组织摄取，在炎症反应组织摄取不明显；SPECT显像示⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃可特异性浓聚于肿瘤组织；SPECT显像结果与⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃在骨肉瘤瘤模型体内分布实验结果一致，提示⁹⁹Tc^m-VEGF_125-136-MAG₃可区分肿瘤与炎症反应，为肿瘤的特异性诊断奠定了实验基础。