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目的:新生儿溶血病(Hemolytic disease of newborn,HDN)是由于母婴血型不合而引起的同族免疫性溶血性疾病,可发生于胎儿和新生儿早期[1]。可引起胎儿早期流产或新生儿溶血性黄疸、贫血、水肿,肝脾肿大甚至死亡等严重后果。目前人类已发现29个血型系统,400多种抗原,其中ABO和RH系统抗原性较强,因此HDN常见于ABO-HDN和RH-HDN。ABO-HDN主要见于O型母亲育有A型、B型胎儿;Rh-HDN则见于Rh阴性母亲再次妊娠Rh阳性胎儿,ABO-HDN第一胎即可发病,而RH-HDN则在第二胎或第二胎以后发病。ABO血型不合溶血相对较轻,Rh新生儿溶血病起病急,进展快,溶血程度重,易出现高胆红素血症及胆红素脑病造成永久性的神经系统后遗症。 新生儿溶血病的发病机制是胎儿从父亲遗传而母亲所没有的红细胞血型抗原,经“胎盘出血”进入母体,刺激母体产生相应IgG抗体,此抗体由于分子量较小,是唯一能穿过胎盘的免疫球蛋白,IgG抗体与胎盘浆膜上的Fc受体结合,通过主动运输进入胎儿体内,和胎儿红细胞上的相应抗原结合,在单核-吞噬细胞内破坏,产生不同程度的溶血,导致新生儿贫血、黄疸、水肿、肝脾肿大,严重者引起核黄疸,造成新生儿残疾,死亡等。通过分析IgG血型抗体效价与HDN的相关性预测HDN的发生。本研究聚焦于邢台地区孕妇血型抗体效价与HDN的相关性,以期为HDN的早发现,早预防,早治疗提供诊断依据;通过微柱凝胶抗球蛋白试验(Micro column gel coombs test MGCT)检测邢台地区母婴血型不合孕妇IgG血型抗体效价、孕妇血清不规则抗体、HDN三项试验,即红细胞直接抗人球蛋白实验(Direct antiglobulin test)、血清游离抗体试验(Freetest)、红细胞抗体放散试验(Elution test),检测新生儿是否出现溶血现象,综合分析邢台地区孕妇IgG血型抗体效价与HDN的相关性,以期为HDN提供诊断依据,减少新生儿溶血病的发生,减轻患儿的家庭负担,提高人口素质,具有重要经济意义和社会意义。 方法: 1.收集病例采用玻片法对夫妇ABO及Rh血型进行鉴定,查找出母婴血型不合的孕妇。本研究对象为2011年6月至2013年12月在邢台市人民医院门诊行产前检查的母婴血型不合的孕妇及其新生儿,包括孕妇为O型Rh(D)阳性,其丈夫为非O型(A型、B型、AB型)者,即妇-夫为O—A、O—B、O—AB血型配对组;和孕妇为Rh(D)阴性,其丈夫为Rh(D)阳性者,即妇-夫为Rh-—Rh+血型配对组,孕妇孕期≥16周,并追踪调查了其新生儿是否出现溶血现象。 2.微柱凝胶抗球蛋白试验(MGCT)检测孕妇血清中IgG抗A(B)抗体效价。即妇-夫为O—A、O—B、O—AB血型配对组分别检测其IgG抗A、IgG抗B、IgG抗A(B)抗体效价,以:<1∶64、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512、1∶1024、1∶2048为抗体效价等级,抗体效价<1∶64为正常,≥1∶64为异常,计数各等级中孕妇例数;同时计数各血型配对组(O—A、O—B、O—AB、Rh-—Rh+血型配对组)中各等级的孕妇例数,计算各血型配对组的构成比。 3.微柱凝胶抗球蛋白试验(MGCT)检测HDN的3项试验:抽取新生儿EDTA-2k抗凝血5ml或脐血5ml,,新生儿溶血病检测卡1检测新生儿ABO血型、和红细胞直接抗人球蛋白实验;新生儿溶血病检测卡2检测血清游离抗体试验和红细胞抗体放散试验,判断新生儿溶血现象。 4.统计学方法处理采用SPSS13.0统计软件进行相关分析;计数资料采用卡方检验;检验水准P<0.05有统计学差异。 结果: 1.本研究经胎儿父母ABO血型及Rh血型鉴定收集到466例母婴血型不合的病例。其中ABO血型母婴不合的孕妇460例,O—A配对组167,O—B配对组217,O—AB配对组76; RH血型母子不合的6例,因样本量少,有待进一步研究。 2.孕妇IgG血型抗体的检测MGCT法检测结果显示: IgG血型抗体效价<1∶64、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512、1∶1024、1∶2048,O-A组孕妇例数分别为:32例、28例、30例、28例、18例、17例、14例,其构成比分别为:19.2%、16.7%、18.0%、16.7%、10.8%、10.2%、8.4%; O-B组孕妇例数分别为:45例、40例、46例、36例、30例、12例、8例,其构成比分别为:20.7%、18.4%、21.2%、16.6%、13.8%、5.5%、3.8%; O-AB组孕妇例数分别为:9例、9例、15例、14例、12例、10例、7例,其构成比分别为:11.8%、11.8%、19.7%、18.5%、15.8%、13、2%、9.2%; IgG血型抗体效价各等级孕妇合计例数分别为:86例、77例、91例、78例、60例、39例、29例,其构成比分别为:18.7%、16.7%、19.8%、17.0%、13.0%、8.5%。、6.3%。IgG血型抗体效价异常占81.3%。 3.新生儿溶血检测结果 3.1 新生儿血型460例O型血孕妇中母婴相合27例,其新生儿均为O型Rh(D)阳性;433例孕妇中HDN阳性患儿180例,其中A型患儿96例,B型患儿84例,其Rh(D)血型均为阳性。 3.2 ABO血型母婴不合的新生儿溶血病检测3.2.1 MGCT法检测结果显示:433例ABO母婴不合新生儿中,HDN阳性患儿180例,其发病率为41.6%(180/433)。其中A型HDN的发病率为39.9%(73/183),B型HDN的发病率为42.8%(107/250),A型发病率与B型发病率比较,差异无统计学意义。(X2=0.37,P>0.05)3.2.2 MGCT法检测结果显示:HDN3项试验中直抗试验阳性率为15.6%(28/180);游离试验阳性率为:74.4%(134/180);抗体释放试验阳性率为:100%(180/180)。 4.孕妇IgG抗A(B)抗体效价与HDN的关系的孕妇IgG血型抗体效价为1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512、1∶1024、1∶2048,其HDN的发生率分别为1.5%、3.9%、28.6%、51.4%、84.7%、89.7%、96.6%。通过相关分析r=0.9751,P=0.0002。IgG抗体效价与新生儿溶血病的发病率呈正相关关系。 结论: 1.ABO系统HDN中,A型HDN的发病率与B型HDN的发病率无差异。 2.IgG血型抗体效价与HDN的发病率呈正相关,随着IgG血型抗体效价的升高,HDN的发病率也随着升高。