[背景]维甲酸是一种维生素A的活性衍生物,作为生物调节因子,在机体各种器官生长发育、细胞分化、增殖凋亡等一系列重要的生物学过程中,发挥着至关重要的作用。维甲酸在几个器官的发育和功能中是必不可少的,其中包括内耳的发育。维持维甲酸的平衡等同于维持完整生物体的正常生理,失控的维甲酸信号可能导致严重的疾病。顺铂是一种常用且有效的抗肿瘤化疗药物,它具有抗癌谱广、作用性强、与许多抗肿瘤药物有协同作用的优点。顺铂已普遍用于治疗各种类型的肿瘤,如生殖系统肿瘤、头颈部肿瘤、膀胱癌等,治疗效果显著。然而顺铂所带来的肾毒性、耳毒性以及神经毒性,使其临床应用受到限制。在运用顺铂等化疗药物的同时,给予补液及使用利尿药物,可以明显地减轻顺铂对肾脏的损害。但是由顺铂所诱导的耳毒性,对人类的损害来说往往是永久性的,顺铂损伤内耳毛细胞,而人类的内耳毛细胞无法再生,从而出现感音神经性听力损失,不仅限制了顺铂在临床上的应用,也给大大降低了肿瘤病人治疗后的生活质量。[目的]探讨维甲酸对斑马鱼胚胎及内耳早期发育的影响;探索维甲酸对斑马鱼神经丘毛细胞在顺铂损伤后的保护作用。[方法]（1）在斑马鱼胚胎发育初期（50%外包状态）时运用维甲酸（RA）的合成抑制剂（DEAB）抑制维甲酸的合成。实验组斑马鱼胚胎用不同浓度（1.0-4.0μM）的DEAB溶液孵育至72hpf（受精后72小时）,后用斑马鱼系统水孵育至120hpf。0-72hpf观察实验组与对照组斑马鱼胚胎的死亡及畸形情况,计算生存率及畸形率。120hpf时观察实验组与对照组斑马鱼幼鱼耳囊及耳石的变化,并计算耳囊的面积。120hpf时用FM1-43FX标记斑马鱼耳囊周围毛细胞并计数。（2）在DEAB孵育液中加入外源性RA,观察对照组、DEAB孵育组、DEAB+RA孵育组、RA孵育组的斑马鱼幼鱼耳囊面积及神经丘毛细胞的变化。（3）采用实时荧光定量PCR（qPCR）检测对照组、DEAB孵育组、RA孵育组的内耳发育相关基因（dlx6a、otx2b和eya1）的表达水平变化。（4）采用顺铂溶液孵育120hpf的斑马鱼幼鱼24h,撤药后分别用RA溶液及DEAB溶液继续孵育斑马鱼幼鱼12小时,采用FM1-43FX标记神经丘毛细胞数目,采用DCFH-DA、DPPP荧光分子探针测定各组斑马鱼幼鱼体内的活性氧（ROS）、脂质过氧化产物（MDA）的含量。[结果]（1）在斑马鱼胚胎发育早期抑制RA合成,观察胚胎发育至72hpf。与对照组相比,不同浓度DEAB孵育组的斑马鱼胚胎出现生存率降低及畸形率升高的现象,并呈现一定的浓度依赖性。畸形的表现主要为斑马鱼胚胎破膜延迟,体长变短,身体长轴弯曲,头部萎缩,眼和耳囊耳石缩小,耳石缺失及位置改变。继续孵育至120hpf,与对照组相比,不同浓度的DEAB孵育组的耳囊面积缩小,耳囊周围神经丘毛细胞减少。对照组与实验组的差异具有统计学意义。（2）在DEAB孵育液中加入外源性RA后,与单用DEAB孵育的斑马鱼幼鱼相比,耳囊面积与神经丘毛细胞数目有所增加,两组之间的差异具有统计学意义,而与对照组相比,单RA孵育组的耳囊面积及神经丘毛细胞数目无统计学差异。（3）与对照组相比,DEAB孵育组的斑马鱼内耳发育相关基因eya1的表达量下调,两组之间的差异具有统计学意义。（4）与对照组相比,顺铂损伤斑马鱼后神经丘毛细胞的数目减少;移除顺铂后加入RA溶液（顺铂+RA）组的神经丘毛细胞数目较顺铂组有所增加,三组间具有统计学差异,而顺铂+DEAB组与顺铂组相比无统计学差异。与对照组相比,顺铂损伤斑马鱼后,体内活性氧、脂质过氧化物含量明显升高,差异均有统计学意义,同时顺铂+RA组斑马鱼体内活性氧、脂质过氧化物含量低于顺铂组,而顺铂+DEAB组的活性氧、脂质过氧化物含量与顺铂组相比无统计学差异。[结论]（1）在斑马鱼胚胎发育早期抑制维甲酸的合成,斑马鱼胚胎的生存率降低及畸形率升高。维甲酸对斑马鱼早期发育至关重要,抑制维甲酸合成后可导致胚胎致死及致畸。（2）在斑马鱼胚胎发育早期抑制维甲酸的合成,斑马鱼幼鱼的内耳耳囊及耳石发育畸形,耳囊面积减小,耳囊周围神经丘毛细胞减少。再运用外源性维甲酸可在一定程度上挽救DEAB所导致的发育畸形及神经丘毛细胞减少。内耳发育相关基因eya1也因发育过程中抑制维甲酸合成后,其表达量下调,影响内耳的发育。说明维甲酸对斑马鱼内耳的发育至关重要。（3）顺铂可致斑马鱼侧线毛细胞数目减少及斑马鱼体内活性氧、脂质过氧化物生成增加,而移除顺铂后使用维甲酸处理可改善顺铂导致的耳毒性改变。说明维甲酸对顺铂所诱导的耳毒性有保护作用。