猪流感病毒的分离鉴定、HA基因的克隆序列分析和血清学研究

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猪流感(SI)是由猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)引起的不同日龄、性别和品种猪的一种急性、热性和高度接触性的呼吸道传染病。1918年美国首次报道了SI的暴发,1930年Shope从猪体中分离到了H1N1亚型猪流感病毒。迄今为止,SI已遍布美、欧、亚、非等世界各地。猪流感的暴发,对全球养殖业造成了巨大的经济损失。猪流感除具有兽医学意义外,更为重要的是生态学和公共卫生意义。目前,猪流感的研究,已成为研究的热点。 2002年,我国一些地方暴发了猪流感。为查明此次流行的病原,本实验室对收集的病料进行了分离鉴定。利用猪流感标准的诊断试剂,鉴定分离毒株为H3亚型猪流感病毒。对分离的毒株,我们进行了大量的生物学特性的研究:分离毒株血凝性广泛,血凝素对热不稳定;分离毒株对酸、热和乙醚等理化因素敏感;致病性试验结果表明,分离毒株对鸡胚表现为高致病力;在试验条件下,分离毒株能感染小鼠和实验猪,表现典型的呼吸道症状和肉眼病变。 利用RT-PCR,扩增了HA基因的完整HA1部分。序列分析结果表明,分离毒株和禽流感H5亚型病毒的序列高度相关。进化分析结果表明,Fujian株猪流感分离株与禽流感病毒属于同一分支。 初步建立了猪流感间接ELISA,优化了猪流感间接ELISA的工作条件,并进行了特异性和重复性试验。结果表明,该方法有很好的特异性和重复性,可适用于猪流感的血清学诊断。 我们用建立的血清学方法,对我国猪群进行了SI血清学调查。结果表明,猪流感已在我国各个猪群存在和流行,其危害也日益加剧。针对猪呼吸道疾病日益危害养猪业的情况,我们同时对猪流感及混合感染相关病原进行了血清学调查。结果表明,混合感染中,SI与APP和PCV感染率高,而SI与PRRS感染率低。
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