【摘 要】
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研究背景:软骨组织缺损修复一直是整形外科临床工作的一大难点。近年来,软骨组织工程的发展为此提供了新的思路。尽管目前已有将组织工程软骨应用于临床的成功个案报道,其临床转化仍然需克服很多问题。目前,组织工程软骨在体转归的评估仍是以组织病理学切片检查为金标准,迫切需要一种安全无创的动态监测手段以检测工程化组织植入后的转归。磁共振成像（Magnetic Resonance Imaging,MRI）是一种软
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研究背景:软骨组织缺损修复一直是整形外科临床工作的一大难点。近年来,软骨组织工程的发展为此提供了新的思路。尽管目前已有将组织工程软骨应用于临床的成功个案报道,其临床转化仍然需克服很多问题。目前,组织工程软骨在体转归的评估仍是以组织病理学切片检查为金标准,迫切需要一种安全无创的动态监测手段以检测工程化组织植入后的转归。磁共振成像（Magnetic Resonance Imaging,MRI）是一种软组织对比度出色,具有丰富成像序列的无创检查手段。MRIT2 mapping成像在组织工程关节软骨生化定量中的价值已有报道,但在组织工程弹性软骨中的有效性尚无定论。研究目的:1.明确基于兔耳软骨细胞-丝素蛋白支架体外构建组织工程软骨构建效果;2.明确基于兔耳软骨细胞-丝素蛋白支架构建的工程化软骨在家兔皮下的成熟与转归过程;3.明确T2 mapping监测基于耳软骨细胞构建的组织工程软骨植入有免疫动物皮下后的转归的应用价值;4.进一步探讨工程工程化软骨在体T2值与GAG、ELN、总胶原、Ⅱ型胶原、Ⅰ型胶原含量之间的相关性。研究方法和结果:1.组织工程弹性软骨构建及在体实验研究1.1基于兔耳软骨细胞-丝素蛋白支架体外构建组织工程弹性软骨的研究方法:将P2代兔耳软骨细胞接种于丝素蛋白支架,体外培养4周后取材进行组织学染色、软骨相关生化定量检测与基因表达检测,评价体外构建效果。结果:P2代耳软骨细胞接种于丝素蛋白支架,经4周体外培养后获得了较满意的弹性软骨样组织。1.2组织工程弹性软骨在家兔皮下的成熟与转归方法:将体外构建的组织工程弹性软骨样组织（EC）与自体耳软骨（AC）、无细胞丝素蛋白支架（SF）植入家兔自体皮下,第2,4,8周后取材进行组织学检测与软骨相关评价。结果:基于耳软骨细胞-丝素蛋白支架构建的工程化软骨在家兔自体皮下早期（～2周）受到急性炎症反应攻击,软骨细胞存活量减少,但存活的软骨细胞至移植后4周仍然能够保持较好的弹性软骨表型。皮下植入后8周,支架尚未完全降解,工程化组织基质中胶原成分改变。2.MRI T2 mapping无创监测组织工程弹性软骨在体转归的实验研究方法:将体外构建的组织工程弹性软骨样组织（EC）与自体耳软骨（AC）、无细胞丝素蛋白支架（SF）植入家兔自体皮下,术后第1,2,4,8周进行MRI检查,然后按规定时间取材进行组织学检测与软骨相关检测。结果:多长TE回波T2映射（2D MIXED T2 Mutislices clear序列）能够区分显示工程化软骨组织、自体皮下移植耳软骨组织以及无细胞丝素蛋白支架在体差别;并能够反映工程化软骨在家兔皮下环境中的成熟与转归过程。工程化软骨在家兔皮下的平均T2值与总胶原、弹性蛋白、GAG含量呈现高度的负相关性（r=-0.946,-0.939,-0.933;P<0.001）;而与Ⅱ型胶原、Ⅰ型胶原含量表现出较弱的负相关性（r=-0.797,P=0.01;r=-0.837,P<0.001）。研究结论:1.基于兔耳软骨细胞-丝素蛋白支架构建的工程化组织在体外培养4周后,能够获得较满意的工程化弹性软骨样组织。2.工程化软骨植入家兔自体皮下早期（～2周）由于急性炎症反应软骨细胞存活量减少,存活的软骨细胞至移植后4周仍然能够保持较好的弹性软骨表型。8周时工程化软骨支架降解尚不完全,并出现纤维化倾向。3.多长TE回波T2映射（2D MIXED T2 Mutislices clear序列）能够清晰显示工程化软骨组织、自体皮下移植耳软骨组织以及无细胞丝素蛋白支架并加以鉴别;并能够反映工程化软骨在家兔皮下环境中的成熟与转归过程。4.基于兔耳软骨细胞-丝素蛋白支架构建的工程化软骨在家兔皮下的平均T2值与总胶原、弹性蛋白、GAG含量呈现高度的负相关性（r=-0.946,-0.939,-0.933;P<0.001）
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