【摘 要】
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双须叶须鱼(Ptychobarbus dipogon)是中国特有鲤科鱼类,仅分布于青藏高原雅鲁藏布江中游干支流中。前人的核型报道显示其染色体数目400之多;而本研究部分前期工作显示其染色体
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双须叶须鱼(Ptychobarbus dipogon)是中国特有鲤科鱼类,仅分布于青藏高原雅鲁藏布江中游干支流中。前人的核型报道显示其染色体数目400之多;而本研究部分前期工作显示其染色体数目可能仅有100左右。为何不同的研究结果存在如此大的差异?或者是由于这个物种内本身就存在染色体数目多态? 为探讨上述问题,本研究采集了22个西藏拉萨河的双须叶须鱼样品,从形态、基因组大小和分子遗传多样性上对其进行了研究。首先结合形态鉴定和母系遗传的线粒体控制区的分子遗传信息确定选用的物种是同一个物种。其次,我们用流式细胞仪测定和分析每个细胞中DNA含量,然后核型实验以及分子实验以评估其基因组大小、染色体的数量,最后用核基因(生长激素基因,GH;Ⅰ型角蛋白,KTⅠ;重组活化基因1,RAG1)的拷贝+等位基因数来评估与基因组大小的相关性。本研究结果显示:(1)形态鉴定和线粒体控制区的结果显示双须叶须鱼聚为一支,不与任何近缘物种混杂;基于D-loop的数据,双须叶须鱼的单倍型多样性Hd为0.645±0.109,核苷酸多样性π为0.185±0.039%,处于较低的遗传多样性水平;(2)虽然核型分裂相不理想,但是分得清染色体数目的分裂相显示染色体数目不会到400条;(3)流式细胞仪测定基因组大小显示其C-值(二倍体体细胞DNA含量的一半)介于1.157~5.880 pg(picogram),提示双须叶须鱼基因组大小存在种内多态现象;(4)三个核基因中,GH和KTⅠ的拷贝+等位基因数为6~11,基因的拷贝+等位基因数随着基因组增大而增加;而RAG1基因的拷贝+等位基因数为1;(5)对RAG1和GH两个基因的所有拷贝+等位基因数构建了系统发育树,显示所有的拷贝+等位基因数与裸腹叶须鱼聚在一支,没有明显的分开,同时根据这两个基因估算的分歧时间介于2.25~4.49 Mya。 综合各个层次的证据显示:双须叶须鱼基因组可划分为几个倍性水平,三个核基因标记综合分析结果显示其多倍化的方式可能既有同源多倍化也有异源多倍化。双须叶须鱼是目前发现的类似于鲫属鱼类的、存在种内染色体倍性多态的第二个鲤科物种。其倍性多态现象的存在为我们研究脊椎动物多倍化问题提供了另一备选物种。为我们利用鲤科鲃系鱼类中这一特殊模型进行脊椎动物多倍化研究提供了基础信息。
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