白僵菌是家蚕重要的病原真菌,其感染家蚕引起的白僵病,往往对蚕桑业的生产造成巨大损失。目前,包括白僵菌在内的真菌对家蚕的作用机理尚不明确。因此开展家蚕抗菌肽enbocin1在抵御白僵菌感染过程中的功能研究,可解析家蚕对白僵菌感染免疫应答反应的分子机理,为从分子水平上阐明家蚕对白僵菌感染的防御机制和白僵菌对家蚕的致病机理提供新的实验依据。用白僵菌分生孢子体表接触感染家蚕P50五龄起蚕,随机收集感染组和对照组幼虫在感染后10个不同时间点的血淋巴、体壁、马氏管、脂肪体。用real-time PCR检测了enbocin1基因在血淋巴、体壁、马氏管、脂肪体组织的时空表达模式,结果显示enbocin1基因主要在脂肪体中上调表达明显,而且上调表达持续至诱导后30h,而在马氏管、体壁中差异表达不显著,在血淋巴中几乎检测不到enbocin1的表达,表明enbocin1对家蚕抵御白僵菌感染可能具有重要作用。构建了重组表达载体PET-30a(+)-Enbocin1,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),成功地诱导表达并用Ni-NTA亲和层析纯化获得了高纯度的重组蛋白enbocin1,经SDS-PAGE检测蛋白大小与预期的一致,约10.8kDa。测得重组蛋白浓度为10mg/mL。经抑菌试验表明其对白僵菌的生长具有较强抑制作用。成功制备了抗enbocin1的多克隆抗体,可用于检测enbocin1的表达,为进一步深入研究enbocin1的功能及其机制奠定了基础。本研究可为阐明其他类型昆虫真菌致病的分子机制提供有益参考,并为开发家蚕白僵病防治新方法提供了理论参考。同时也为进一步研究家蚕enbocin基因的功能奠定基础。